聚乳酸甲壳素接骨板的体外细胞毒性研究

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1、第一军医大学硕士学位论文聚乳酸-甲壳素接骨板的体外细胞毒性研究姓名：李毅申请学位级别：硕士专业：颌面外科指导教师：李少萍20040522缩略词CHIPLAPLA／CHIPGAPDSPLIASR．PLASR．PGAGAGMTTDMSOPlFCMRG袋oDSE醚TEMLMME缩略词表(ABBREVlA霹ONS)英文全称ChitinPolylacticacidPolylactieacid-ChitinPlatePolyglycolicacidPolydioxanonePoly·-L·—Lactideself-reinforcedPLAself-reinforcedPG

2、AGlyeosaminoglyean3一(4，5一dimethylthiazol一2一y1)一2，5-diphenytetrazoliumbromideDimethylSulphoxideProliferativeIndexFlowCytometryRelativeGrowthRateOpticalDensityScanningElectronMicroscopeTransmissionElectronMicroscopeLightMicroscopyModulusofelasticity中文众称甲壳索聚乳酸聚乳酸．甲壳索接骨掇聚乙薛酸蒙二筑六环戮左旋聚乳酸鲁灌

3、强聚乳酸自增强聚乙醇酸氨基餐糖多聚糖3．(4，5)．2一唑嚷-(2，5)-=苯基漠纯西氮瞧蓬二甲旗亚砜绥黪壤殪搔数流式细胞仪援对罐蓬度光密度扫攒瞧镜透射电子显微镜光学漫锾镶检查弹性模量聚乳酸．甲壳素接骨板的体外细胞毒性研究专业：口腔颌面外科学磺究嶷：李毅导师；李少萍副教授中文摘要研究背景嚣前稿床广泛应溺的金耩骨折内溺定材料，由予存在应力遮挡效成、腐蚀刺激周围缀织、易感染等弊端，不利于骨折愈合，一般需二次手术取密；丽可吸浚往曹拼内嚣定糖辩，主要戳聚乳酸为代表，冀有无皮力遮挡效应、避免再次手术取出簿优点，被认为怒理想的骨折内固定材料。然瑟，涟着研究纛痘掰豹遘一步深入

4、，聚霉‘酸传隽蚤事厅蠢霞宠榜糕静缺陷也进一步暴褥：首先，聚乳酸降解时生成的乳酸等酸性降解产物，可镬是部缀织内熬pH镶下降，诱发迟发性冥携炎毪爱液；其次，聚襞羧的体内降解周期过长，影响骨折愈合餍的骨组织改建，也容易导致感染等，瞪铡了聚瓿酸的寝瘸。甲壳素是自然界中少见韵带正电衙的高分子聚合物，与软骨基质糖氨多糖(GAG)结构相似。该材料具有良好螅生物槌容性，无拳，降鳃过程中产生的低分子寡聚糖在体内不积蒜，凡乎没有免疫原性，对人体无不良反应，目前己应用于伤口敷料、悸缺损充填及药物缓释系统等生物医学领域，其缀学应用研究十分活跃。但甲巍素在水及有机溶剂中不溶解，壳聚糖只溶

5、于稀酸中，所以其应用范围受到限制。在甲壳素分子结构孛含有镶多活泼鹣羝基(-NH2)和羟萋(-OH)，易于迸幸亍化学修诲和改性，如果引入多功能基团，还可拓宽其应用领域。援据荬生携学特瞧，我销骚翻了掰整豹曹圣蓐雨露定耪辩——聚巍羧一甲壳素接骨板(PL～CHI)及螺钉。甲壳素降解时释放的氨基葡萄糖等碱性小分子物质，可中和凝乳酸隆解时耩教出的擘L酸等鞭性产物，抑制迟发性异物炎性反应的发生；甲壳素中羟基(-OH)、氨藜(-NH2)等大擞活性基豳，可与聚乳酸分子中的活性基团羟基(-OH)、羧基(-COOH)通过氢键、酯键、氨键、离子键等多种形式结合，增强聚乳酸．甲壳素援骨板

6、的机械强度，满足骨折内固定的需骚；另外，聚乳酸的降解过程，怒无需酶参与鸹简单永解过程，两甲壳豢其有懿鲟的亲水往，掰加速水分子扩散渗透进入聚乳酸+甲壳豢接骨板内的速殿，促进了聚孚L酸降解，缩短萁体内降解程浚躅麓。二者籀互健避、相互奉}充，蠲j邈，聚乳酸一举壳素接骨板具有良好的性能，有望成为一种具有良好发展前景的可吸收露舞内鞫定耪精。研究萤瓣遂邀体羚绑腿培养技术，袋兵l不阉的缨腿枣性试验方法，捻溅聚爨黢．甲壳桊接骨掇接触细胞后细胞发生的特异性嫩物学变化，并预测最终体内应用时的组织细胞反应，套短期内较经济、篱便地梭测出聚霉L酸．甲汽素接臀板的细胞毒性，为动物实验的进行

7、与否提供先决条件，并为今艨聚乳酸，甲壳豢接骨板的临床成用提供理论依掇和实验基础。研究方法1．分别用聚乳酸．甲壳索接骨掇浸提液(测试样品，实验组)、聚乳酸接管叛浸疆滚(参照榉品组)秘RPMll640鞯葬蓦(空自对照组)璐养L929细胞，通过细胞增嫩度法(RGR法)、细胞生长抑制法(MTT法)、滚式缭藏纹法(FeM法)，蕊察荚生长、壤戆及形态学变纯，对聚乳酸．甲壳素接骨板的细胞毒性进行评价：2。将L929续藏壹接援耱予聚孥￡酸．串蠹素接磐援表鞭，进行嶷接接触法实验，通过光镜、扫描电镜及透射电镜观察细胞的生长、增殖投影态学变化，避一步对聚乳酸一甲壳豢攘鸯坂的缨臌毒性进

8、蟹译馀。3，用SD大鼠成