高效液相色谱法测定肝组织中核黄素含量

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1、中华I临床营养杂志2009年8月第17卷第4期ChineseJournalofClinicalNutrition，Aust．!．231·论著·高效液相色谱法测定肝组织中核黄素含量蒲玲玲韦京豫王宇平杨继军吴健全郭长江【摘要】目的建立测定肝组织核黄素含量的高效液相色谱方法。方法取肝组织样品加人0．1mol／L盐酸，用匀浆器研磨制备匀浆后，经酸解、10％胰蛋白酶水解处理，用微孔滤膜过滤后取滤液分析。采用AtlantisCl8色谱柱(150mm×4．6mm，5m)分离，以甲醇：5mmol／L醋酸铵(35：65，v／v)为流动相，流速为1．

2、0ml／min，荧光检测器检测时激发波长为450nm，发射波长为520nm。结果本法测定核黄素的线性范围为1．0—200ng／ml，最低检测限为1．0ns／ml；日内和日间测定的核黄素标准品的峰面积的相对标准偏差分别为2．83％和3．76％，样品分别为0．71％和2．17％；核黄素在样品中的加标回收率为98．6％一101．1％。结论建立的高效液相色谱方法简便、准确、灵敏，可用于测定肝组织中核黄素的含量。【关键词】高效液相色谱法；肝组织；核黄素【中图分类号】R151．2【文献标识码】A【文章编号】1674-635X(2009)04-

3、0231—04DeterminationofriboflavininhepatictissuebyhighperformanceliquidchromatographyPULing—ling，WEIJing—yu，WANGYu-ping，YANGJi-jun，WUJian—quan，GUOChang-fiang．DepartmentofNutritionandFoodSciences，InstituteofHygieneandEnvironmentalMedicine，AcademyofMilitaryMedicalScience

4、s，Tianjin300050，ChinaCorrespondingauthor：GUOChang-jiang，E—mail：guocjtj@yahoo．con．cn【Abstract】ObjectiveTodevelopahighperformanceliquidchromatographic(HPLC)methodforthede—terminationofriboflavininhepatictissue．MethodsThehepaticsamplesweregrindeduniformlywithhomogeni—zer

5、．Thehomogenatewasthentreatedwith0．1mol／LHCLand10％trypsinhydrolysis．andanalyzedafterfiltra—tion．AnAtlantisC18column(150mmx4．6mm，5m)wasused．Themobilephaseconsistedof35％methanoland65％5mmol／Lammoniumacetatesolution．Theflowratewas1．0ml／min．Thespectrophotofluorometerwasseta

6、tawavelengthof450nmforexcitationand520nmforemission．ResultsAgoodlinearcorrelationbetweenriboflavinconcentration(from1．0ng／mLto200ng／mL)andfluorescenceintensitywasestablished．Thedetectionlimitwas1．0ng／mkThestandardsubstanceofriboflavinandthesamplesinsingle—dayandmulti—

7、dayrelativestandarddeviationswereintherangeof2．83％-3．76％and0．71％-2．17％．respectively．Therecoveriesforri-boflavininhepatictissuewereintherangesof98．6％一101．1％．ConclusionTheestablishedHPLCmethodisquick，accurate，andsensitive，andcanbeappliedtothedeterminationofriboflavininh

8、epatictissue．【Keywords】Highperformanceliquidchromatography；Hepatictissue；Riboflavin核黄素是维持身体健康所必需的B族水溶性维FAD)辅酶的形式贮存于血、组织及体液中。