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时间:2017-11-13
《医药学药学毕业论文 转染抑癌基因pten对人乳腺癌zr751细胞的细胞周期和增殖能力的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号:XXXXXXXXX姓名:XXX专业:医药学药学论文题目:转染抑癌基因PTEN对人乳腺癌ZR751细胞的细胞周期和增殖能力的影响指导老师:XXX二〇一一年十二月十日作者:李祥勇,林观平,周克元【关键词】人乳腺癌ZR【摘要】目的:观察PTEN(phosphataseandtensinhomologydeletedonchromosometen,第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因)对人乳腺癌细胞ZR751细胞增殖和细胞周期的影响。方法:利用脂质体介导法将携带有野生型和突变型PTENcDNA的真核表达载体pBPwtPTEN和pBPG129
2、RPTEN导入人乳腺癌ZR751细胞(质粒转染成功后实验分为CWTPTEN组、CG129RPTEN组和未转染质粒组即对照组)后,以RTPCR、Westernblot分析目的基因的表达,并采用MTT法和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期。结果:CWTPTEN组、CG129RPTEN组细胞PTENmRNA及PTEN蛋白出现明显的高表达。CWTPTEN组细胞生长的抑制率可高达42.7%,与对照组比较,差异有显著性(P0.05)。但CG129RPTEN组细胞生长的抑制率与对照组比较,差异无显著性(P0.05)。流式细胞术显示CWTPTEN组细胞周期从G1期到S期已发生抑制。结论:野生
3、型PTEN可依赖其磷酸酶活性抑制肿瘤细胞的增殖,并最终诱导细胞凋亡。【关键词】人乳腺癌ZR751细胞;PTEN基因;细胞周期【Abstract】Objective:ToinvestigatetheeffectofthePTEN(phosphataseandtensinhomologuedeletedonchromosometen)geneoncellcycleandproliferationinhumanbreastcancercelllineZR751.Methods:TheeukaryoticexpressionvectorpBPwtPTENandpBPG129RPTE
4、NcontainingPTENcDNAwastransfectedintoZR751cellsbylipofectamine.Threegroupswereset:CWTPTEN,CG129RPTENandcellswithouttransfectionasthecontrolgroup.ReversetranscriptionpolymerasechainreactionandWesternblotmethodswereusedtodetectPTENexpressioninthetransfectedZR751cells.Thecellcycle,cellprolife
5、rationandcellapoptosisoftheZR751cellswasdeterminedbytheMTTandflowcytometry.Results:HighexpressionofPTENmRNAandproteinwasseeninthetransfectedZR751cells.TheproliferationofCWTPTENcellswereinhibitedby42.7%(vsthecontrolgroup,P0.05),whileCG129RPTENcellsshowednosignificantchangeinproliferation(vs
6、thecontrolgroup,P0.05).ThecellcyclefromG1toSofCWTPTENcellswasinhibited.Conclusion:WidetypePTENgenemightsuppressthegrowthandinducestheapoptosisinhumanbreastcancercelllineZR751cellsthroughitsphosphataseactivity.【Keywords】ZR751;PTEN;cellcycle;proliferationPTEN(phosphataseandtensinhomologydele
7、tedonchromosometen,第10号染色体上磷酸酶和张力蛋白同源缺失的基因)是继p53基因之后新近发现的与各种肿瘤密切相关的一个抑癌基因,其突变与缺失见于多种恶性肿瘤,如前列腺癌、胶质瘤、乳腺癌等。目前发现PTEN是唯一一个编码具有双重磷酸酶活性的抑癌基因[1],因其凭借磷酸酶活性负调控PI3K/Akt信号传导途径而备受关注。虽有研究表明,PTEN的缺失与突变与乳腺癌的发生发展密切相关[2],然而目前有关PTEN基因对乳腺癌细胞生长抑制的作用多集中在对乳腺癌组织的研究,而PTEN基因转染对人乳腺癌细胞的研
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