医药学医学毕业论文 性传播疾病的非侵入性检查方法研究新进展

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学医学论文题目：性传播疾病的非侵入性检查方法研究新进展指导老师：XXX二〇一一年十二月十日　　摘要:近年来淋病、非淋菌性尿道炎、尿道内尖锐湿疣、艾滋病等性传播病的非侵入性检查方法研究取得新进展，其中核酸扩增技术敏感性高、特异性强，可作为淋病、非淋菌性尿道炎的首选检查方法，对尿道内尖锐湿疣的诊断和疗效评定也有一定的临床意义。采用免疫学方法检测HIV-抗体，以唾液为标本，具有与血清标本同样的诊断意义。　　人们一直在寻找更灵敏、特异、快速、非侵入性

2、的检测方法来诊断性传播疾病（STD）。近年来，国外学者应用清晨首次尿（FCU），或长时间（超过4小时）不排尿后的首段尿（FVU）作离心沉淀，用尿沉渣来检测淋球菌、沙眼衣原体（CT）、人类乳头瘤病毒（HPV）等病原体，应用唾液或口腔粘膜渗出液（OMT）检测HIV-抗体，以分子生物学、免疫学新技术来检测这些病原体或其抗体，使STD诊断手段显著增加。现就近年国外有关STD的非侵入性检查方法研究新进展作一综述。　　淋病　　（一）核酸扩增技术：核酸扩增技术的问世，使临床实验室检测感染性病原体的敏感性显著提高，可检测到标本中

3、一个基因拷贝[1]。聚合酶链反应（PCR），和连接酶链反应（LCR），是核酸扩增技术中最常用的方法[2]。　　PCR是1985年建立起来的一种体外扩增特异DNA片段的技术，它需要一对引物（或探针）。Crtchfelt等[3]对344例男子的尿道拭子、尿沉渣标本和192例女子的宫颈拭子、尿沉渣标本分别进行淋球菌的共同PCR扩增试验。扩增产物用微孔板进行了特异性杂交和比色法测定，并将检测结果与标准的培养法结果相比较。淋球菌真阳性由针对其16srRNA的PCR确定。结果：PCR检测淋球菌的敏感性和特异性，男子尿道拭子标

4、本分别为97.3%、97%，尿沉渣标本分别94.4%、98.5%；女子宫颈拭子标本分别为100%、99.4%，尿沉渣标本分别为90%、95.9%。结果提示：无论是以尿道拭子、宫颈拭子为标本，还是以尿沉渣为标本，都是高度敏感的。PCR法检测尿沉渣中的淋球菌，为普查高危人群中淋球菌的感染提供了一种有效的方法。　　LCR为1989年建立起来的另一种核酸扩增技术，它需要两对引物（或探针），在连接酶的作用下使相邻两引物拉增片段连接起来。Stary等[4]对200例男子和125例女子分别取尿道或宫颈拭子、FVU沉渣作LCR试

5、验检测淋球菌，以尿道或宫颈拭子淋球菌培养作为“金标准”。结果：男子尿道拭子标本LCR法检测淋球菌的敏感性和特异性均为100%，尿道拭子培养法检测淋球菌的敏感性和特异性分别为95.9%、100%，FVU沉渣标本LCR法检测淋球菌的敏感性和特异性分别为98%、100%。女子FVU沉渣标本LCR法检测淋球菌的敏感性最高：94.7%，宫颈拭子标本培养法敏感性最低：63.2%(P＜0.05)。该研究结果提示男子FVU沉渣LCR法检测淋球菌具有优越性。　　（二）免疫学技术：近年来出现一种增强发光酶免疫分析新技术（ELEIA）

6、。其基本原理是将某种发光剂或其衍生物加入到一个免疫反应体系中，在酶的催化作用下产生发光，可以发光强度来计算待测抗原或抗体的量[5]。而加入发光增强剂后，发光信号增强，持续时间延长，可以重复测量，方法灵敏、准确[6、7]。　　非淋菌性尿道炎　　Crotchfelt等[3]也同时对CT进行了共同PCR扩增试验。CT的真阳性由DFA或针对CT的主要外膜蛋白（OMP-1）PCR确定。结果：男子尿道拭子标本PCR法检测CT的敏感性和特异性分别为96.2%、99.3%，尿沉渣标本分别为88.2%、98.6%。女子宫颈拭子标本

7、PCR法检测CT的敏感性和特异性均为100%，尿沉渣标本分别为100%、99.4%。结果提示可以用尿沉渣来代替尿道或宫颈拭子作标本，对大规模高危人群进行CT感染的普查。　　Gaydos等[9]对高危人群男女各300例的生殖道拭子和尿沉渣分别用LCR法检测CT。LCR测定在CT质粒内用配体标记探针扩增的特殊系列，扩增产物用自动免疫分析仪检查。对于不同结果的标本，对CT的OMP-1的靶基因用LCR法检测予以证实。结果：以尿沉渣为标本，LCR法检测CT的的敏感性和特异性分别为：男子100%、99.6%，女子100%、9

8、8.5%。提示LCR法检测FVU中的CT具有高度的敏感性和特异性，用该方法普查STD高危人群中CT的感染，极有实际意义。　　随后，Gaydos等[10]对该课题进行了下一步的研究。他们取得408例美国高校女生志愿者（低危人群）FCU沉渣，分别用PCR法和LCR法检测CT。结果：PCR法的敏感性，特异性分别为：93.8%、99.1%，LCR法的敏感性、特异性分别为89%、9