医药学医学毕业论文 rna干扰靶向抑制胃癌sgc7901细胞cox2基因和蛋白表达的研究

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1、湖南师范大学本科毕业论文考籍号：XXXXXXXXX姓名：XXX专业：医药学医学论文题目：RNA干扰靶向抑制胃癌SGC7901细胞COX2基因和蛋白表达的研究指导老师：XXX二〇一一年十二月十日作者：李玉明蒋宏吴峰阶于兴泉宋丙潭刘春远【摘要】目的利用RNAi技术，以胃癌SGC7901细胞COX2作为靶点，建立有效的RNA干扰方法，为胃癌及其复发和转移提供基因治疗的新方法。方法设计并合成6条COX2siRNA和1条阴性对照siRNA，用3种不同的转染试剂分别转染胃癌SGC7901细胞，荧光定量PCR和Westernblotting检测胃癌SGC7901细胞中COX2基因和蛋白的

2、表达。结果TOPtranfection能够有效介导报告基因DNA（pcDNA/lacZ）转染SGC7901细胞，细胞转染率为56.0%,明显优于其它两种转染试剂，转染的pcDNA/lacZsiRNA对报告基因产生显著抑制；TOPtranfection介导的COX2siRNA有效抑制了胃癌细胞COX2mRNA表达，与对照组相比抑制效率达90%以上，最高达98.3%，同时抑制胃癌SGC7901细胞COX2蛋白表达71.5%。结论TOPtranfection能够有效介导COX2siRNA转染SGC7901细胞；靶向COX2的RNA干扰能有效抑制胃癌细胞中COX2基因和蛋白

3、的表达，为胃癌的治疗以及抑制胃癌复发和转移提供基因治疗新的靶点和方法。【关键词】RNA干扰；环氧酶2；胃癌；基因治疗【Abstract】ObjectiveToestablishanefficientmethodofRNAinterferenceonCOX2ofgastriccancercelllineSGC7901,andprovideanewpathwayforgenetherapyofgastriccanceranditsrecurrenceandmetastasis.MethodsSixpiecesofCOX2smallinterferenceRNA(siRNA)an

4、donenegativecontrolsiRNAweredesignedandsynthesizedchemically,gastriccancercelllineSGC7901weretransfectedwiththemmediatedbythreedifferenttransfectionreagent.COX2mRNAandCOX2proteinofgastriccancercelllineSGC7901werecheckedwithrealtimequantitativePCRandWesternblottingmethodsrespectively.Results

5、TransfectionofgastriccancercelllineSGC7901withreportgeneDNA（pcDNA/lacZ）couldbemediatedbyTOPtranfectionefficiently.TransfectionrateofgastriccancercelllineSGC7901was56.0%,cotransfectionofgastriccancercelllineSGC7901withDNA（pcDNA/lacZ）andpcDNA/lacZsiRNAcouldbemediatedbyTOPtranfectionefficiently

6、,siRNAbroughtaboutdistinguishedinhibitionefficiencyonDNA（pcDNA/lacZ）.Comparedtonegativecontrol,COX2mRNAingastriccancercelllineSGC7901measuredbyrealtimequantitativePCRaftertransfectionwithCOX2(0～5)siRNAsmediatedbyTOPtranfectionweredegradedsignificantly,COX2siRNAresultedinhighesttransfection

7、efficiency98.3%,otherswereabove90%.ProteinexpressionofCOX2inSGC7901celllinemeasuredbyWesternblottingwaslower71.5%aftertransfectedwithCOX2siRNA.ConclusionTransfectionofgastriccancercelllineSGC7901withCOX2siRNAcouldbemediatedbyTOPtranfection