脂肪源性干细胞体外成骨特性的研究

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1、脂肪源性干细胞体外成骨特性的研究作者：李俊刚，王万明，孙效棠【摘要】　　目的探讨兔脂肪源性干细胞体外成骨分化能力。方法取3个月龄新西兰白兔颈背部皮下脂肪组织，Ⅰ型胶原酶消化获得细胞。绘制细胞生长曲线，采用免疫细胞荧光法检测细胞表面抗原CD44、CD45；分别加入条件培养液对所获得细胞进行成骨成脂诱导，并分别进行形态学、碱性磷酸酶、钙盐沉积和油红O染色相关检测；将脂肪源性干细胞分为成骨诱导组和非成骨诱导组，分别于诱导后1、2、3、4周检测两组的碱性磷酸酶和钙离子浓度并作统计分析。结果a)所获细胞CD44阳性表达，CD45阴性表达；所绘制的生长曲线成典型的“

2、S”型。b)在诱导条件下，碱性磷酸酶及钙盐沉积均呈阳性表达，油红O染色为阳性。c)碱性磷酸酶浓度在诱导组与非诱导组之间存在组间差别，在各个时间点诱导组碱性磷酸酶浓度均高于非诱导组(P＜，n＝5)；诱导组碱性磷酸酶浓度在不同诱导时相其浓度变化趋势不同(P＜，n＝5)；钙离子浓度在诱导组与非诱导组之间存在组间差别，在各个时间点诱导组钙离子浓度高于非诱导组(P＜，n＝5)。诱导组钙离子浓度在不同诱导时相其浓度变化的趋势不同(P＜，n＝5)。结论脂肪干细胞的易分离培养、增殖快和良好的成骨诱导活性完全符合对种子细胞的要求，是一种理想的骨组织工程种子细胞。【关键词】

3、脂肪源性干细胞；成骨分化；碱性磷酸酶；钙离子　　Abstract：ObjectiveToexplorethedifferentiationofadiposederivedstemcells(ADSCs)fromrabbitsintoosteogeniccellsinInthisstudy，ADSCsweregainedbycollagenaseⅠdigestionofsubcutaneousfatfromthenapeofNewZealandwhitesurfaceantigenCD44、CD4wereidentifiedbyimmunofluore

4、scenceandcellauxodromewereADSCswereperformedosteogenicandadipogenicdifferentiationrespectively，followingwithtextsrelatedmorphology，alkalinephosphataseassay，VonKossaandrathonumredOweredividedintoosteogenicinducedgroupandosteogenicnoninducedphosphataseassayandcalciumconcentration

5、ofthesetwogroupswerecheckedandstatisticsfromthecheckwereanalyzedat1，2，3，4wafterthesetwogroupswerebothThisstudygotfollowingresults：a)ADSCsCD4expressionwerepositiveandADSCsCD4expressionnegative；cellauxodromeswereS)Alkalinephosphataseassay，VonKossaandrathonumredOstainofADSCswereallp

6、ositiveundertheinfluenceofosteogenicandadipogenicdifferentiation)Alkalinephosphataseassays(ALP)weredifferentofthesetwogroupsALPofinducedgroupswashigherthanthatofnoninducedgroupateachdifferenttime(P＜，n＝5)andALPoftheinducedgroupwasdistinctindifferenttendencyunderdifferentinduct

7、ion(P＜，n＝5).Calciumconcentrationweredifferentofthesetwogroupscalciumconcentrationofinducedgroupswashigherthanthatofnoninducedgroupateachdifferenttime(P＜，n＝5)andcalciumconcentrationoftheinducedgroupwasdistinctindifferenttendencyunderdifferentinduction(P＜，n＝5).ConclusionThisstud

8、ysuggeststhatADSCscanbeisolatedandcultur