正常结膜囊细菌的研究

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1、正常结膜囊细菌的研究【摘要】结膜囊正常菌群因不同的环境、年龄、抗生素应用情况，尤其是不同的培养基和取样、培养方法，培养结果差异较大。结膜囊带菌率总体呈下降趋势，凝固酶阴性的表皮葡萄球菌、类白喉杆菌或棒状杆菌、金黄色葡萄球菌始终是最多的几种细菌。【关键词】结膜囊细菌培养0引言结膜囊正常菌群是指共生于结膜囊，并与其保持动态平衡的多种需氧菌群和厌氧菌群。这些菌群总是随着个人、环境因素的变化而变化，一旦这种平衡被破坏，正常细菌就可导致眼部感染。尽管从1898年有文献记载以来，已经作了大量工作，但持续监测正常结膜囊菌群变化对预防眼

2、部感染仍然具有极为重要作用。由于影响结膜囊正常菌群的因素繁多，以及抗生素的独特作用，现以是否大量应用抗生素为划分标准，对正常结膜囊带菌情况、取样和培养方法、影响因素及变化规律作一综述。1抗生素广泛使用前抗生素广泛使用前结膜囊细菌处于一种自然生长状态，细菌培养阳性率高达57%~100%[1,2]，正常结膜囊中最常见细菌是白色葡萄球菌、类白喉杆菌和金黄色葡萄球菌，其阳性率分别为：26%~70%，20%~36%，7%~%，其它细菌包括干燥弯曲菌、链球菌、肺炎球菌等共10种。对细菌分布与年龄的关系进行分析发现：草绿色链球菌和肺炎

3、球菌主要存在于儿童；随着年龄增长，葡萄球菌培养阳性率逐渐升高；葡萄球菌和类白喉杆菌的培养阳性率表现为平行关系，都是在20~40岁之间最低，在50~60岁之间最高[3-5]。此外，研究还表明，溶血性链球菌和肺炎球菌培养阳性率随气温升高呈轻度上升[3]。对儿童和成人之间细菌分布的这种差异性，以及气候对细菌培养的影响，在这一时期未进行深入研究。葡萄球菌和类白喉杆菌随年龄而增长，主要是因为结膜囊细菌培养阴性人数下降及结膜囊细菌的共生[3,4,6,7]。抗生素广泛使用前，人们对结膜囊正常菌群的研究也处于探索阶段，对细菌的培养主要集

4、中于需氧菌。从1898年Lawson[8]报道了对200例结膜囊用白金环自球结膜取样，琼脂平板培养发现细菌阳性率为90%以后，陆续有用钝刀片、干、湿棉拭子、将丝线置于下穹隆取样、用肉汤冲洗结膜囊取样；以普通琼脂平板、不同浓度血平板、肉汤、巧克力血平板、血清等作培养基；在室温、22oC及37oC培养等方法的报道[2,9-12]。不同取样、培养方法及结果：1925年Kuffler等用琼脂平板培养检测正常结膜囊细菌阳性率%，仅培养出葡萄球菌、干燥弯曲菌和双杆菌等3种细菌。而Frank等[4]对62例构成类似的人群从睑结膜、球结

5、膜以白金耳刮取样本，采用同样的培养基进行需氧菌培养，用巯基乙酸盐肉汤试管和Spray血平板行厌氧菌培养，需氧菌阳性率仅79%，白色葡萄球菌69%，类白喉杆菌40%，金黄色葡萄球菌13%，产碱杆菌、链球菌、草绿色链球菌各1例，未发现干燥弯曲菌和肺炎球菌，并未发现厌氧菌。Frank未发现厌氧菌的原因在于取样部位不含厌氧菌或标本过少[6,11]。Lucic[2]对正常结膜以钝刀片自下穹隆取样，接种于血平板培养阳性率100%，其中白色葡萄球菌60%，干燥弯曲菌51%，金黄色葡萄球菌和肺炎球菌各7%；1935年Devorah等[3

6、]对1122例正常结膜囊用1%糖水湿棉式子取样，以含糖血平板培养，阳性率%，白色葡萄球菌%，类白喉杆菌%，金黄色葡萄球菌%，链球菌%，肺炎球菌%,八叠球菌1%，但草绿色链球菌、溶血性链球菌却较少。同一作者采用相同取样方法、不同培养基，其结果无明显差异；而不同作者采用相同取样方法，不同培养基，结果不同。表明不同作者培养结果差异较大与所使用培养基、取样和培养方法缺乏统一标准有关[2,10-13]。各种细菌培养阳性率总和超过100%[3,4,6,7]，缘于同一结膜囊共生两种或多种细菌。抗生素使用后.1抗生素使用早期0世纪80年

7、代以前的抗生素主要是青霉素、链霉素等从培养物中提取的未加修饰的抗生素，对细菌具有较强杀菌作用，使得细菌的培养出现分离总数及葡萄球菌培养阳性率下降、肺炎双球菌和大肠菌类培养阳性率呈增高趋势；细菌培养阳性率53%~100%，居前3位的白色葡萄球菌%~%，棒状杆菌属33%~71%，金黄色葡萄球菌5%~%[6,7,13-14]。细菌分离种类多达24种，其原因可能是：细菌谱本身的改变；取样方法和培养基的改进；生化检测技术的发展。对Fahmy等[6]，Smith[14]和Locatcher-Khorazo的研究进行比较发现，不仅阳性

8、率差异较大而且细菌的种类也有明显差别，这种差异除了依然存在的培养基、取样和培养方法缺乏统一标准[2,12]外，还包括大肠菌类的交叉感染、纳入人群地区差异和气候的影响[14,15]，以及缺乏纳入与排除标准。针对这种差异，一些研究者开始从单纯的细菌培养转入更深入的研究。.细菌合并生长合并两种细菌者48%～%，3种及以上5