白芍总苷对大鼠体内细胞色素p450的调控作用研究-中药学专业论文

《白芍总苷对大鼠体内细胞色素p450的调控作用研究-中药学专业论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、优秀毕业论文河北医科大学学位论文使用授权及知识产权归属承诺本学位论文在导师(或指导小组)的指导下，由本人独立完成。本学位论文研究所获的研究成果，其知识产权归河北医科大学所有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用。凡发表与学位论文主要内容相关的论文，第一署名单位为河北医科大学，试验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。否则，承担相应的法律责任。t≮予j!’j≈：搿’：；。一．囊研究生硌搿，导师签硝司二级学院缚1’一：意≯0．嚣。训罗年弓月、，ffj河北医科大学研究生学位论文独创性声明本论文是在导师指导下进行

2、的研究工作及取得的研究成果，除了文中特别加以标注和致谢等内容外，文中不包含其他人已经发表或撰写的研究成果，指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写，文责自负。研究生答名翱帮，翩磷土锎1训9年乡月≯f曰精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文目录中文摘要．．1英文摘要．．5英文缩写10研究论文白芍总苷对大鼠体内细胞色素P450的调控作用研究引言．11第一部分白芍总苷对正常大鼠CYP450亚型酶的影响—1L——i一日U舌13材料与方法13结果．23附图．25附表32讨论35小结36参考文献36第二部分白芍总苷对C

3、Cl4肝损伤大鼠CYP450亚型酶的影响—1￡．。j一只U舌38材料与方法38结果39附图．．．42附表50讨论54小结56参考文献56结论57综述中药对细胞色素P450影响的研究进展．58致谢66个人简历67精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文中文摘要白芍总苷对大鼠体内细胞色素P450的调控作用研究摘要目的：白芍总苷(Totalglucosidesofpaeony,TGP)是白芍的有效部位，主要含有芍药苷(paeoniflorin，Pae)、芍药内酯苷(albiflofin，Alb)等单萜类成分。现代药理学

4、研究证实TGP具有明显的保肝作用，能显著对抗多种因素所致的急慢性肝损伤、肝纤维化等。课题组前期对TGP在正常和病理状态下的吸收、分布、排泄进行了系统性的研究，并对白芍总苷在大鼠体内的代谢产物进行了分析。细胞色素P450酶是机体内最重要的药物代谢酶，参与药物及各种内源性、外源性化合物在体内的代谢过程。因此为了更深入的了解TGP在大鼠体内的代谢过程，本实验进一步研究了TGP对细胞色素P450酶的影响，分别采用WesternBlot和RT-PCR两种方法从蛋白和mRNA两个层面研究TGP对正常大鼠和CCl4肝损伤大鼠6种细胞色素P450亚型酶

5、CYPlA2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1的影响，以期探讨白芍总苷对大鼠细胞色素P450的调控作用。方法：I白芍总苷对正常大鼠6种CYP450亚型酶的影响1．1实验动物分组与给药健康Wistar大鼠25只，a，体重(180-220)g，随机分为5组：空白对照组，TGP低、中、高剂量给药组，阳性给药组。每组5只，正常对照组给予纯化水，TGP低、中、高给药组灌胃给予TGPO．47g／kg、1．41g／kg、2．82g／kg，阳性对照组腹腔注射地塞米松注射液75mg／kg，连续14天，末次给药24h后

6、断头处死各组大鼠，迅速取肝，4℃预冷生理盐水中冷却，吸干水分，称重，将肝组织剪碎，洗净血液，分装于冻存管中，液氮速冻，．80℃保存备用。1．2蛋白免疫印迹法测定6种CYP450亚型酶蛋白表达采用差速离心法制备肝微粒体。肝组织按1：4(g：mL)加入0．25mol／L蔗糖溶液，匀浆器制备肝匀浆，9000g离心20min，取上清液于19000g离心20rain，再次取上清液60000g离心60rain，下层粉红色沉淀即为精品参考文献资料优秀毕业论文万方数据精品参考文献资料优秀毕业论文中文摘要肝微粒体，沉淀用0．1mol／LTris-HCl(

7、含20％甘油，pH=4)混悬均匀，分装，干冰速冻，．80。C贮存备用，采用Branford方法测定肝微粒体的蛋白浓度。WesternB10t法检测TGP对CYPlA2,CYP3A4、CYP2D6、CYP2C19、CYP2C9、CYP2E1蛋白表达的影响1．3RT-PCR法测定6种CYP450亚型酶rnRNA表达应用Omiga2．0引物设计软件进行引物设计。采用Trizol法提取肝脏中的RNA。取100mg肝组织于研钵中研磨至粉末状，转移至EP管中，加入1mLTrizol室温下放置5min，再加入氯仿0，2mL，剧烈颠倒混匀，室温放置5m

8、in，4℃，12000g离心15min，转移上层水相400止于另一新1．5mLEP管中，加等体积异丙醇混匀后．20。C放置30min，然后4℃，12000g离心10min，弃上清，加冰预冷的75％乙醇lmL