白芍总苷胶囊对eae大鼠防治作用的研究

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1、白芍总苷胶囊对EAE大鼠防治作用的研究摘要：目的：观察白芍总苷胶囊(totalglucosidesofpaeony，TGP)对雌性Wistar大鼠实验性身免疫性脑脊髓炎(ExperimentalAutoimmuneEncephalomyelitis，EAE)的发病各期情况、脑组织病理特点变化、中枢神经系统病灶的相关炎性因子含量变化以及周围血淋巴细胞亚群的变化，比较不同剂量的TGP对EAE模型的影响及探讨其作用可能的机制，为探索多发性硬化(Multiplesclerosis，MS)新的治疗途径及更合理有效的用药提供有意义的实验依据。

2、方法：用豚鼠脊髓匀浆(guineapigspinalcordhomogenate，GPSCH)、完全福氏佐齐(completefreund’Sadguvant，CFA)、百日咳疫苗浆液pertussisvaccine，PV)免疫中年雌性Wistar大鼠，建立EAE模型，并用不同剂量TGP灌胃进行干预治疗。将50只中年雌性Wistar大鼠随机分成5组，每组10只，分别为：佐剂对照组：生理盐水+CFA；EAE模型组：GPSCH+CFA+PV；低剂量TGP组：GPSCH+CFA+PV+TGP75mg／kg·d；中剂量TGP组：GPSCH

3、+CFA+PV+TGP150mg／kg·d；高剂量TGP组：GPSCH+CFA+PV+TGP300mg／kg·d；将造模型当天定为第1天，三种剂量TGP组大鼠在抗原免疫后第1天开始，分别灌服相应剂量TGP药物，每天上午一次，直至第16天(相当于发病的高峰期)。定时对EAE组、佐剂组及高、中、低剂量TGP组大鼠症状进行观察评分，以大鼠症状连续3天无加重、出现四肢瘫痪或死亡时作为EAE发病高峰期。记录各组大鼠的发病率、发病潜伏期时间、进展期时间和高峰期神经功能障碍评分、统计发病率。于发病高峰期时处死大鼠，未发病大鼠30天后处死，摘除眼

4、球留取眶静脉血、脑脊髓组织。将脑脊髓组织经处理、切片、行HE染色，低倍光镜下观察其病理变化,用酶联免疫吸附(enzyme—linkedimmunosorbentassay，ELISA)法检测各组大鼠发病高峰期外周血单个核细胞(peripheralbloodmononuclearcell，PBMC)分泌INF-γ、IL-4水平和脑组织细胞因子IL-2、TNF-α含量,用流式细胞仪检测各组大鼠发病高峰期时外周血淋巴细胞亚群的情况。用SPSS17.0软件包装进行统计学分析。结果：1．各组大鼠的临床表现观察：①佐剂组无大鼠发病。②与EAE

5、组比较，低剂量组能减轻临床症状，(p

6、型脱髓鞘病灶，不同剂量FTY720组中仅少数偶见脱髓鞘病灶。3．各组大鼠外周血INF-γ、IL-4比较：比较佐剂组，EAE组INF-γ高，IL-4低(p

7、O．05)。大中小剂量比较差异有统计学意义。4．各组大鼠脑组织IL-2、TNF-α比较：EAE组较佐剂组高(p

8、量、CD4+／CD8+比值与EAE对照组比较差异均有统计学意义(P<0．05)；高中低剂量TGP治疗组外周血CD4+、CD8+含量及CD4+／CD8+比值间差异均无统计学意义(P>O．05)。结论：1．用豚鼠脊髓匀浆能很好的诱导大鼠EAE模型，成功