白芍总苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎防治作用的研究

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1、泸州医学院硕士学位论文白芍总苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎防治作用的研究姓名：潘祺申请学位级别：硕士专业：神经病学指导教师：李作孝201205白芍总苷对实验性自身免疫性脑脊髓炎防治作用的研究摘要JIUlIIIIHIIllUlllIllIIl目的：观察白芍总苷(TGP)对雌性Wistar大鼠实验侄Y目2习22凭4蕊529脑脊髓炎(EAE)I拘发病情况、脑组织病理变化、外周血单个核细胞(PBMC)分泌INF吖及IL．4能力、脑组织匀浆炎性因子IL．2、n盯．0L含量变化以及周围血T淋巴细胞亚群变化的影响，目

2、的在于探讨TGP对EAE的防治作用及其可能的机制。方法：将50只中年雌性Wistar大鼠随机分成佐剂对照组、EAE对照组、TGP低、中、高剂量治疗组，每组各10只。采用豚鼠脊髓匀浆(GPSCH)加完全福氏佐齐(CFA)及百日咳疫苗浆液(PV)皮下注入EAE对照组及高、中、低剂量TGP治疗组制作EAE模型，采用CAF加Pv皮下注入佐剂对照组。自造模当日起，低、中、高剂量TGP治疗组分别以TGP75mg／kg·d、TGP150mg／kg·d、TGP300mg／kg·d剂量灌胃一次，EAE对照组及佐剂对照组

3、常规饲养。每天上午定时对佐剂对照组、EAE对照组及低、中、高剂量TGP组大鼠症状进行观察评分，以大鼠症状连续3天无加重、出现四肢瘫痪或死亡时作为EAE发病高峰期。记录各组大鼠发病潜伏期时间、进展期时间和高峰期神经功能障碍评分。于发病高峰期时处死大鼠，未发病大鼠30天后处死，留取大鼠眶静脉血、脑组织。将脑组织经切片、行HE染色，光镜下观察其病理变化。采用酶联免疫吸附(ELISA)法检测各组大鼠发病高峰期PBMC分泌INF一小IL一4水平和脑组织细胞因子IL．2、TNF．仅含量，采用流式细胞仪检测各组大鼠

4、发病高峰期外周血T淋巴细胞亚群的情况。用SPSS17．0软件进行统计学分析。结果：1．各组大鼠的临床表现观察：(1)佐剂组均无大鼠发病，EAE对照组及低、中、高剂量TGP治疗组均有发病。(2)EAE对照组大鼠发病潜伏期为9．7+2．4天，低、中、高剂量TGP组大鼠发病潜伏期分别为11．4+2．1天、13．5±2．4天、16．3±3．0天，低、中、高剂量TGP组潜伏期较EAE对照组明显延长(P

5、剂量TGP组潜伏期较中剂量组明显延长(P

6、障碍评分为3．0±O．8分，低、中、高剂量TGP组大鼠发病高峰期神经功能障碍评分分别为2．3±O．5分、1．5±O．3分、1．1±O．2分。低、中、高剂量TGP组大鼠发病高峰期神经功能障碍评分较EAE对照组明显降低(P

7、无异常改变，EAE对照组及低中高剂量TGP治疗组大鼠脑组织都出现T'EAE典型的病理改变，小血管周围炎性细胞浸润，呈袖套样改变，血管周围白质明显脱髓鞘改变。TGP各治疗组脱髓鞘改变及炎性细胞浸润较EAE对照组减轻；中、高剂量TGP治疗组较低剂量治疗组减轻，高剂量TGP治疗组病理改变最轻。3．各组大鼠发病高峰期PBMC分泌INF吖、IL．4能力比较：EAE对照组大鼠发病高峰期PBMC分泌,IFN．1，水平较佐剂对照组高(P

8、低、中、高剂量TGP组大鼠发病高峰期PBMC分泌IFN吖水平较EAE对照组降低(P