树突状细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的作用研究

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1、福建医科大学硕士毕业论文分类号：R446.9学校代码：10392学科专业代码：100208学号：200901185福建医科大学硕士研究生毕业论文树突状细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的作用研究RoleofDCinexperimentalautoimmuneencephalomyelitis(EAE)学位类型：医学硕士所在学院：协和临床医学院研究生：卢娉霞学科、专业：临床检验诊断学导师：曹颖平教授研究起止日期：2011年8月至2013年1月答辩日期：2013年6月1日二○一三年六月1福建医科大学硕士毕业论文2福建医科大学硕士毕业论文目录中文摘要……………

2、………………………………………………………………..2英文摘要……………………………………………………………………………..3缩略词简表………………………………………………………………..................5正文…………………………………………………………………………………..第一章前言………………………………………………………………………...6第二章材料和方法2.1主要试剂和药品…………………………………………………………………82.2主要仪器及耗材…………………………………………………………………92.3主要试剂及动物的准备………………

3、………………………………………….92.4动物分组…………………………………………………………………………102.5模型制作过程……………………………………………………………….........102.6模型评价………………………………………………………………………….112.7流式细胞术………………………………………………………………………..122.8RT-PCR………………………………………………………………...................132.9ELISA………………………………………………………………………….......152.10分析

4、及统计方法…….……………………………………………………………16第三章结果3.1实验小鼠发病情况…….………………………………………………...................173.2流式细胞术结果…….……………………………………………………………….203.3RT-PCR结果…….………………………………………………………...............243.4ELISA结果………………………………………………………………............26第四章讨论………………………………………………………………………….28第五章结论………………………

5、………………………………………….............32参考文献…………………………………………………………………………………33致谢………………………………………………………………………………............36综述……………………………………………………………………………………....373福建医科大学硕士毕业论文树突状细胞在实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠中的作用研究摘要目的：建立慢性-非缓解型EAE模型，运用流式、RT-PCR、ELISA等方法从细胞++膜表面分子和基因水平检测树突状细胞（DC）成熟度，CD4CD25Treg数量，FoxP

6、3mRNA及Ror-γtmRNA表达水平、小鼠外周血IL-6及TGF-β分泌水平，以探讨树突状细胞(DC)在慢性EAE小鼠模型中诱导免疫学相关机制。方法：54只10-12周近交系健康清洁级雌性C57BL/6小鼠，随机分为两组：EAE组（n=30只）和佐剂对照组（n=24只）。各组按病程又分为：发病初期、高峰期及慢性期。EAE组用乳化好MOG35-55多肽和完全弗氏佐剂（CFA）免疫C57BL/6小鼠，[1]佐剂对照组则用等量的PBS代替MOG35-55，按Ingunn评分标准进行临床症状评分，++运用流式细胞术检测DC表面CD11c、CD83以及CD4CD

7、25Treg数量；应用RT-PCR方法检测小鼠淋巴细胞FoxP3mRNA及Ror-γtmRNA表达水平；应用ELISA方法检测小鼠外周血中IL-6及TGF-β的分泌水平。结果：1.小鼠模型EAE组小鼠发病率达80%（24/30），最高临床评分可达5分；佐剂对照组则无一发病，临床症状评分均为0分。++2.流式细胞术检测EAE组发病各时期脾细胞悬液中CD11cCD83DC细胞数较佐剂++对照组升高(P<0.05)；EAE组发病初期和高峰期脾细胞悬液中CD4CD25Treg/淋巴细++胞的比例较佐剂对照组降低(P<0.05)，慢性期EAE组脾细胞悬液中CD4CD

8、25Treg/淋巴细胞的比例则较佐剂对照组升高(P<0.05)；佐