猪伪狂犬病血清抗体gb-elisa检测方法的建立

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1、猪伪狂犬病血清抗体gB-ELISA检测方法的建立?10?中国兽药杂志2011,45(7):10~13/罗飞,等猪伪狂犬病血清抗体gB—ELISA检测方法的建立罗飞,李宇琴,陈义平,周洁(1.中国动物卫生与流行病学中心诊断液研究室,山东青岛226032;2.扬州大学兽医学院,江苏扬州225009;3.湖南九鼎科技(集团)有限公司,湖南岳阳414000)[收稿日期]2011—04—25[文献标识码]A[文章编号】1002—1280(2011)07—0010—04[中图分类号]$852.65[摘要]用纯化的猪伪狂犬病病毒gB重组蛋白为抗原,建立了检测猪伪狂犬病血清

2、抗体的gB—ELISA方法.最佳反应条件为:抗原包被浓度为3.15Ixg/mL,待检血清稀释度为1:40.该方法对猪圆环病毒病,猪瘟,猪细小病毒病,猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病),猪乙型脑炎,猪布氏杆菌病5种疾病阳性血清和SPF猪阴性血清检测呈阴性反应.批间,批内试验变异系数均不超过8%.用该方法与HerdChekELISA试剂盒同时对119份血清进行了平行检测,其相对敏感性,特异性和符合率分别为:75%,80.7%和79%.试验结果表明:猪伪狂犬病血清抗体gB—ELISA检测方法具有较高的敏感性和特异性,且重复性好,可用于猪伪狂犬病毒血清抗体检测.[关键词

3、]猪伪狂犬病毒;抗体;gB—ELISAEstablishmentoftheIndirectELISAfortheDetectionofViralGlycoproteinBAntibodiesagainstSwinePseudorabiesLU0Fei,LIYu—qin,CHENYi—ping,ZHOUJie'(1.DiagnosticReagentLaboratory,ChinaAnimalHealthandEpidemiologyCenter,Qingdao,Shandong266032,China;2.CollegeofVeterinaryMedicin

4、e,YangzhouUniversity,Yangzhou,Jiangsu225009,China;3.HunanJiudingTechnology(Group)Co.,Ltd,Yueyang,Hunan414000,China)Abstract:ThegB—ELISAwasestablishedbyusingthepurifiedrecombinantproteinasantigenfordetectingPRVantibodiesinpigsera.AllreactionconditionsofthisgB—ELISAwereexplored.Theop

5、timalcoatingconcentrationofantigenis3.15mL,theserumsamplewasdilutedto1:40.TheresultsarenegativewhentheantiserumagainstPCV,PPV,HCV,JEVandPRRSweredetectedbythisgB—ELISA.TheCVbetweenandwithinbatchesofdetectionwerelessthan8%.119pigserasamplesweresimultaneouslydetectedbythisindirectgB—E

6、LISAandHerdChekgBELISAkit.TherelativesensitivityandspecificityofindirectgB—ELISAestablishedinthestudywere75%and80.7%.ThecoincidenceratebetweenthesetwoELISAwas79%.Allresultsshowedthatthisassayhadagoodsensitivity,specificityandrepeatability,itcouldbeusedfordetectionofPRVantibodyinpig

7、sera.Keywords:swinepseudorabiesvirus;antibody;gB—ELISA伪狂犬病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)是疱疹病毒科(Herpesviridae)疱疹病毒亚科的成员,可引起猪,牛,羊及野生动物的伪狂犬病,猪是其主要宿主.伪狂犬病给养猪业造成了巨大的经济损基金项目:"十一五"国家科技支撑项目(2006BAD6A13)作者简介:罗飞(1984年一),男,湖南人,硕士,研究方向为猪病综合防控.E—mail:12032004@163.con通讯作者:陈义平,研究员,动物疫病诊断试剂研发.2011,45(7)

8、:10~13/罗飞,等中国兽药杂志失j.为了加强对该

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