猪伪狂犬病病毒gb蛋白b细胞表位解析及其阻断elisa抗体检测方法的建立

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1、分类号．６５…部巧学号２０１２１０７０４８？■爲音農違义參硕：ｔ学位论文、＂．．今巧－／Ｃ＾猪伪狂犬病病毒班蛋白Ｂ细胞表位解析及其＞阻断ＥＬＩＳＡ抗体检测方法的建立．、‘＇．．．－‘、八山巧孙海凤■ｙ￣＞－．＇．．？Ｖ■－■、■＇咕＿一．‘＊？产‘；尸。皆ｙ—－，．．’－，．＇．苗．■兰．．；：，？，？－■－？＞，＇＾■．＞，＇．．、．１指导教师姜平教授：专业名

2、称预防兽医学研究方向动物传染病防制—＿＿—＾答辩曰期二〇五年五月＾＊？Ｊ＼皆．一－，、Ｉ－？＞？．＊Ｖ．＾：１ＩＶ‘：？■？？＜－，－ＥＶＡＬＵＡＴＩＯＮＯＴＢＣＥＬＬＥＰＩＴＯＰＥＳＯＦ班ＰＲＯＴＥＩＮＡＮＤＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴＯｆＢＬＯＣＫＩＮＧＥＬＩＳＡＷＩＴＨＭＯＮＯＣＬＯＮＡＬＡＮＴＩＢＯＤＹＦＯＲＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＡＮＴＩＢＯＤＹＴＯＰＲＶＢｙＳｕｎＨａ报ｎｇ

3、ＡＴｈｅｓｉｓＳｕｂｍｉｔｔｅｄ化ＮａｎｉｎＡｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｊｇｇｙＩｎＰａｒｔｉａｌＦｕｌｆｉｌｌｍｅｎｔｏｆ化ｅＲｅｑｕｉｒｅｍｅｎｔｆｏｒｔｈｅＭａｓｔｅｒＤｅｇｒｅｅｏｆＡｇｒｏｎｏｍｙＣｏｍｐｌｅｔｅｄｉｎＡｐ抽２０１５，ＣｏｍｍｅｎｃｅｍｅｎｔｉｎＭａ２０１５ｙ，原创性声明：所呈交的学位论文本人郑重声明，是本人在导师的指导下，独立进行研巧工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写

4、过的作品成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者（需亲笔）签名年＾月日／学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权南京农业大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可Ｗ采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编学位论文。保密□，在年解密后适用本授权书。本学位论文属于不保密＾＂＂（请在

5、Ｗ上方框内打Ｖ）学位论文作者－（需亲笔）签名；＞９４年月日］／导师（需亲笔）签名：年＾月日／目录目录猜要１ＡＢＳＴＲＡＣＴＨＩ上篇文献综巧一章伪狂犬病瓣研雛展第１１鏡学１．１１病毒粒子结构１１．２病毒基因组结构与蛋白２２流行病学３３致病机理３４临床症状及病理变化４５诊断方法５５．１病毒的分离鉴定５５．２电镜观察５５．３血清中和实验（ＳＮ）６５．４酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）６５．５免疫巧光染色（圧）６５．

6、６聚合酶链式反应（ＰＣＲ）６６防６ｇ６．１ＰＲＶ自然弱毒疫苗７６．２灭活疫苗７６．３ＰＲＶ亚单位疫苗７６．４ＤＮＡ疫苗８６８．５基因缺失疫苗参考１献９下篇研究内容第二章江苏省猪伪狂犬病病毒强毒株分离与致病性研究１７１材料与方法１８ｉ猪伪狂犬病病毒班蛋白Ｂ细胞表位解析及其阻断ＥＬＩＳＡ抗体检測方法的建立１１８．１主要材料１．２病毒分离鉴定１８１．３病毒滴度测定１９１．４ＰＲＶｇＣ、ｇＤ基因的ＰＣＲ扩増、克隆与基因测序２０１

7、．５基因遗传进化树分析２１１．６ＰＲＶｇＣ、典基因氨基酸序列比对分析２２１．７ＰＲＶ不同毒株毒力比较２２１２４．８病理学观察１．９组织中ＰＲＶＤＮＡ载量的检测２４２淵２５２１病毒分离与鉴定２５．２２Ｃ和Ｄ基因％．ｇｇ序列分析２．３ｇＣ和班氨基酸序列分析２７２．４猪人工感染试验结果２８３３０参考文献３２第吉章猪伪狂犬病病毒班和班蛋白单克隆抗体的制备与鉴定３５１材料与方法％１％．１材料１．２方法３７１．３小鼠免疫４０１．４

8、间接ＥＬ投Ａ筛选方法的建立４０１．５单克隆抗体的制备４１１．６单抗亚类鉴定４３１．７抗体分泌稳定性测定４４１４４．８单抗腹水制备１．９单抗特异性鉴定４４２结