乙肝病毒前s1蛋白相对滴度与hbv-dna定量表达相关性研究

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1、乙肝病毒前S1蛋白相对滴度与HBV-DNA定量表达相关性研究【摘要】目的：探讨前S1蛋白(Pre-S1)相对滴度与HBV-DNA定量表达的相关性。方法：用ELISA法检测180份标本前S1蛋白、乙肝标志物(HBVM)，荧光定量PCR法检测HBV-DNA;计算Pre-S1相对滴度值,计算HBV-DNA常用对数值。结果：180份标本中Pre-S1和HBV-DNA阳性检出率没有差异(P>0.05)，Pre-S1相对滴度与HBV-DNA定量对数值在标志物HBeAg分组和不同临床类型中同步升降，呈正相关，相关系数分别是0.9789、0.9380。结论：Pre-S1

2、抗原相对滴度与HBV-DNA定量结果密切正相关,有利于临床分型、治疗。【关键词】Pre-S1相对滴度；前S1蛋白、HBV-DNA定量1990年Petit［1］等观察到乙肝前S1蛋白(Pre-S1)主要存在于血清完整的HBV表面，同时还认为Pre-S1是HBV-DNA复制的必然伴随物，与HBV复制关系密切。检测结果表明乙肝E抗原和HBV-DNA阳性组100%检测到前S1抗原。进一步研究表明前S1蛋白参与介导病毒颗粒粘附宿主细胞，并直接反应HBV-DNA的血清浓度［2，3］。为进一步探讨前S1蛋白与HBV-DNA的关系，我们对Pre-S1和HBV-DNA进行定量研

3、究，现将结果报告如下。1材料和方法71.1标本来源2006年9月～2007年3月总共7个月收集急慢性乙型肝炎患者、HBsAg携带者和正常健康体检者标本共180份，其中急性乙型肝炎患者(AH)30份，慢性活动性肝(CAH)35份，慢性迁延性肝炎(CPH)35份无症状携带者(ASC)40份健康体检标本40份作阴性对照，患者都符合《病毒性肝炎防治方案》(1990上海)诊断标准。1.2仪器、试剂和方法①芬兰MK3型酶标仪，WELLWash４洗板机，瑞士罗氏LightcyclerTM全自动荧光定量PCR诊断系统。②Pre-S1检测试剂购于上海阿尔法生物技术有限公司,乙肝

4、标志物检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb,检测试剂购于上海科华公司，(ELISA法)按说明书操作；HBV-DNA检测试剂购于上海科华公司PCR荧光定量法。③将前S1蛋白的吸光度/Cutoff比值拟定为相对滴度，计算均数和标准差,HBV-DNA以copies/ml对数计算均数和标准差(±s)，均数和相关系数的显著性检验用t检验，率的检验用u检验。2结果72.1180份HBsAg阳性标本Pre-S1和HBV-DNA检出结果表1Pre-S1和HBV-DNA检出结果从表1可见180份标本中Pre-S1检出率40%(72/180)，HBV-D

5、NA检出率33.33%(60/180)，两者比较无显著差异(P>0.05)，两者均阳性52例，均阴性100例，两者符合率84.44%(152/180)。2.2对Pre-S1和HBV-DNA均阳性的52份标本，按HBeAg分组统计Pre-S1相对滴度和HBV-DNA定量对数值从表2可见，在HBeAg+组HBV-DNA值高，Pre-S1相对滴度值高，HBeAg-组与HBeAg+组HBV-DNA值比较有非常显著性差异（P<0.01）；Pre-S1相对滴度HBeAg-组与HBeAg+组比较也有显差异，而HBeAg-组间比较Pre-S1和HBV-DNA均没差

6、异。计算Pre-S1和HBV-DNA相对滴度和病毒载量对数的相关系数r=0.9789,经t检验P<0.01，说明两者关系密切。表2Pre-S1和HBV-DNA均阳性分组定量结果注：*与“HBeAg+”组比较组间差异P<0.01，△P<0.05。2.3不同临床类型HBV感染标本Pre-S1相对滴度和HBV-DNA定量对数值关系表3不同临床类型HBV感染标本Pre-S1相对滴度和HBV-DNA定量对数值关系注：*与ASC比较，P<0.05。7从表3可知，AH和CAH组Pre-S1相对滴度和HBV-DNA对数值与CPH和ASC组同步增高，CA

7、H与CPH比较，P<0.05有显著性差异，统计Pre-S1组与HBV-DNA组相关性，相关系数r=0.9380，高度相关。3讨论乙型肝炎病毒Pre-S1蛋白经常存在于HBV标志物如HBeAg、HBV-DNA或HBV-DNAP阳性血清中，故认为是病毒复制的标志物之一［4］,有些学者认为不能正确地反应HBV的复制情况［5］。HBV-DNA是HBV复制的直接依据，本研究的目的是从量的角度进一步探讨Pre-S1与HBV-DNA的相关关系。本研究结果表明：Pre-S1和HBV-DNA两组分别从180例标本中检出率分别为40.00%和33.33%，两者比较无显著差异

8、(P>0.05),且阴阳性符合率