乙型肝炎病毒前s1抗原与hbv-dna和hbeag的相关性分析

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1、乙型肝炎病毒前S1抗原与HBV-DNA和HBeAg的相关性分析王敏(黑龙江省大庆油田总医院集团龙南医院163453)【中图分类号】R512.6+2【文献标识码】A【文章编号】1672-5085(2010)32-0249-02既往研究中显示前S1抗原主要存在于血清HBV表面，前S1抗原与HBV-DNA、HBeAg检测率高度符合，是一项十分重要的病毒复制指标，可作为HBeAg和HBV-DNA检测的补充和对照。木实验通过荧光定量PCR检测HBV-DNA及用酶联免疫法(ELISA)检测HBeAg,Anti

2、-HBe及前S1抗原，对前S1抗原与HBV-DNA,HBeAg进行相关性分析，探讨前S1抗原在乙型肝炎病毒检测中的意义。1材料和方法1.1对象木组对象为在我院治疗的207例乙型肝炎患者，乙肝表面抗原(HB-sAg)阳性，年龄12〜70岁，中位年龄42岁。对照组为80例健康体检者，年龄22〜60岁，中位年龄40岁，乙型肝炎病毒标志物均为阴性。且ALT,AST水平在正常范围内。1.2标木采集空腹下取静脉血3mL，3000r/min离心10min,分离血清检测用。1.3仪器和试剂采用深圳匹基生物工程有限

3、公司的HBV-PCR荧光定量检测试剂盒，用RocheLightCycler荧光PCR检测仪检测HBV-DNA；用上海科平生物有限公司提供的试剂盒检测HBeAg、Anti-HBe；用上海复星长征医学科学有限公司提供的试剂盒检测前S1抗原。1.4检测方法1.4.1HBV-DNA的检测HBV-DNA采用实时荧光定量PCR法检测。①标本处理。②扩增试剂制备及加样：HBV-PCR反应液、Taq酶及VNG。③PCR扩增：扩增产物与特异的寡核卄酸探针进行杂交。④测定与探针结合的扩增产物，测定的线性范围为1.0&

4、times;103〜5.0×107copies/mL,若检测标本大于5.0×107copies/mL,报告为&81:;5.0&1^17^5;107(:(^65/mL。1.4.2前S1抗原、HBeAg、Anti-HBe的检测：采用酶联免疫法。1.4.380名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清再测前S1抗原。1.5统计学方法采用SPSS11.0软件进行相关统计学分析。两种标志物的显著性关联性采用配对资料的X2检验。2结果2.1前S1抗原与HBeAg相关分析在HBV-DNA阳性的

5、患者中，HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占69.5%;Anti-HBe阳性、HBeAg阴性的血清中，前S1抗原的阳性率占61.5%,两组经X2检验，差异无统计学意义(P>0.05)见表1。表2207例HBV-DNA阳性与HBeAg、前S1抗原相关分析从表2可以看出，HBsAg阳性、HBeAg阳性、Anti-HBe阴性的患者HBV-DNA的拷贝数一般在107及107cpoies/ml以上。而在HBV-DNA的低拷贝(103〜106copies/ml)中，前S1抗

6、原的阳性率要明显高于HBeAg的阳性率，经X2检验，P<0.05,具有统计学意义，提示对无条件检测HBV-DNA而HBeAg阴性的血清，检测前S1抗原，可对乙肝病毒的复制起到补充作用。2.2对照组前S1抗原检测结果80名乙肝病毒标志物均为阴性的健康人血清前S1抗原结果均为阴性。3讨论HBV外膜蛋白包括S、前S2和前S13种成分，前S1蛋自在病毒侵入肝细胞中起重要作用，含有前S1的蛋白主要存在于Dane颗粒和管型颗粒上，前S1蛋白在病毒感染、装配和刺激机体产生免疫反应等方面起十分重要的作用。从

7、表I可以看出，HBeAg阳性、Anti—HBe阴性的血清、HBeAg阴性、Anti—HBe阳性的血清前S1抗原的阳性检出率相似，两组经X2检验，差异无统计学意义(P>0.05)与文献报道一致。说明前S1抗原与HBeAg无明确的相关。目前临床上用于评估HBV复制的指标主要冇HBV-DNA和HBeAg。HBeAg与HBVDNA含量呈正相关，HBeAg阳性表示HBV活动性复制，提示完整病毒颗粒存在。虽然定量PCR法检测HBV-DNA己成为S前判定HBV复制最重要和可靠的指标，但由于需要较高的实验条

8、件，许多基层医疗单位尚不能开展。传统上认为HBeAg阴性，即可代表病毒复制己停止。从本实验可以看出HBeAg阴性的血清，并不代表病毒没有复制(见表2)。在病毒高拷J4数的状态下，HBeAg的阳性率和前S1抗原的阳性率几乎没有差异；但在低拷贝数的状态下(103〜106cOpieS/mL),前S1抗原的阳性率要明显高于HBeAg的阳性率，且经过X2检验，具奋统计学意义。研究证实，HBeAg阴性的慢性乙肝患者存在前C区末端1896位发生G—A点突变，产生一个新的终端密码子，阻断HBeAg