慢性乙型肝炎患者e抗原-前s1抗原及hbv-dna检测及相关性研究

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1、慢性乙型肝炎患者e抗原前S1抗原及HBV-DNA检测及相关性研究【摘要】目的分析慢性乙型肝炎患者的e抗原、前S1抗原与HBV-DNA含量在反映乙肝病毒复制方面的相关性及临床意义。方法对598例慢性乙肝（e抗原为阴性的小三阳）患者的血清采用ELISA方法检测前S1抗原和乙肝五项指标，聚合酶链反应（PCR）方法定量检测HBV-DNA。结果598例患者血清,小三阳组Pre-S1Ag阳性率为77.1%（191/248）,HBVDNA平均含量为5.26±1.32（106copies/ml）、阳性率为70.7%（175/248），均分别高于1、4阳性组和1、5阳性组，差异有统计学意义

2、（P0.05）。结论HbeAg阴性也不能排除乙肝病毒的复制，检测HBV-DNA和Pre-S1Ag可判断慢性乙型肝炎患者是否存在病毒复制，且两者相关性较好，对于乙肝患者（特别是e抗原为阴性的慢性患者）在常规乙肝五项检测的基础上对加做Pre-S1Ag和HBV-DNA检测有助于乙肝的临床诊疗及预后判断，有重要临床意义。【关键词】乙型肝炎病毒；e抗原;阴性HBV-DNA;乙肝；HBV-DNA；前S1抗原；乙肝五项；小三阳7我国是乙型肝炎病毒高流行地区，在乙型肝炎的诊断中,习惯用以HBeAg是否阳性来判断乙型肝炎患者体内乙型肝炎病毒［1］，但由于HBeAg变异株的出现,仅仅依靠检测乙

3、肝五项标志物中的HbeAg来判断HBV）的复制及传染性的强弱显然是不可靠的，HBV-DNA是被认为诊断乙肝病毒是否复制和有无传染性的“金标准”［2］，HBV前S1抗原（Pre-S1）也是近年来公认的HBV感染、复制和乙肝患者诊断、治疗和预后的一个重要标志［3］，为此，本文观察分析了慢性乙型患者的e抗原、前S1抗原与HBV-DNA含量在反映乙肝病毒复制方面的相关性及临床意义，现报道如下。1资料与方法1.1标本来源598份血清标本均来自我院内科门诊和病房e抗原为阴性的慢性乙型肝炎患者,其中男328例，年龄28～71岁，平均年龄（52.5±10.2）岁；女270例，年龄26～77

4、岁，平均年龄（56.5±12.5）岁。所选患者均有肝病史5年以上，符合慢性肝病的诊断标准。1.2仪器与试剂乙肝五项检测试剂盒有上海科华生物技术有限公司生产，Pre-S1Ag试剂盒由上海阿尔法生物技术有限公司提供，两种试剂酶标仪器均为芬兰MultiskanMK3酶标检测仪；HBV-DNA检测仪器为SLAN荧光定量PCR仪，试验盒由上海申友生物技术有限责任公司提供。所用试剂盒均通过卫生部批检，并贴有防伪标签，均在有效期内，加样所用移液器均为上海求精生化试剂仪器有限公司生产，均经过市计量局校正。71.3方法1.3.1检测方法早晨抽取患者空腹静脉血3～5ml加入无抗凝剂的干燥试管或

5、含促凝分离胶真空管，放置37℃水浴箱，待凝固后离心分离血清，1～2h内开始检测。血清乙肝五项和前S1抗原检测应用ELISA方法，HBV-DNA采用聚合酶链反应（PCR）方法定量检测，上述检测均严格按照试剂盒和仪器操作说明书进行加样、洗板以及比色，乙肝五项和前S1抗原按酶标仪结果判读阴阳性，HBV-DNA以大于106copies/ml为阳性。1.3.2分组分析按照乙肝五项常见模式分组，将e抗原为阴性的慢性乙型肝炎患者分为3组：小三阳组248例（“HBsAg+，抗-HBe+，抗-HBc+”），1、4阳性组（HBsAg+、抗-HBe+组）220例；1、5阳性组（HBsAg+、抗-

6、HBc+组）130例，将以上3组血清Pre-S1、HBV-DNA阳性率进行统计并比较分析。1.3.3统计学方法采用SPSS17.0统计分析软件对检测结果进行分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，计数资料采用χ2>/sup>检验，P0.05），结果见表1。表1慢性乙肝Pre-S1阳性率、HBV-DNA平均含量、阳性率的比较3讨论7乙型肝炎病毒（HBV）附着于肝细胞上，最重要的介导部位是前S1蛋白的氨基酸（AA）21-47片段，变异的病毒只要在这一区段完好就有传染性，因此，前S1蛋白（抗原）在病毒侵入肝细胞过程中起重要作用，近年来越来越多的研究［4～5］表明，前S1抗原作

7、为HBV血清学新的标志物能够充分反应机体的体液免疫状况,对乙肝病毒感染的早期诊断和判断预后显现出了较高的临床应用价值，HBV-DNA检测是判断病毒复制活跃和具有传染性的直接可靠依据，能够直接检测患者血清中病毒的拷贝数量，从而反映患者机体内病毒血症的水平。本文检测结果和分组统计显示，无论是小三阳组还是其他两组，Pre-S1Ag的阳性率和HBVDNA阳性率有很好的正相关性，也进一步表明Pre-S1Ag是判断病毒复制活跃和具有传染性的一项重要指标。乙肝五项指标做为乙肝病毒血清标志物在临床应用已经有二十多年，其临床意义已经