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1、RPHPLC法测定大鼠血浆中姜黄素含量作者:顾吉晋,邓英杰,王浩,张伟明,王敏【摘要】目的采用RPHPLC法测定大鼠血浆中姜黄素的含量。方法血浆样品经处理后,按以下色谱条件测定姜黄素的含量:DiamonsilC18柱(4.6mm×250mm,5μm),柱温:室温;流动相:乙腈2%醋酸溶液(58∶42);流速:1.0ml/min;检测波长:426nm.结果在本色谱条件下血浆中的杂质峰较少,姜黄素和内标物及其他内源性干扰成分可成功分离。采用乙酸乙酯液液萃取法处理血浆样品,萃取回收率最高。在0.1~0.5mg/L浓度范围内,线性关系良好,回归方程y=0.0026x-0.0756,r=0.998
2、4;日内、日间精密度RSD符合生物样品的分析要求;加样回收率和萃取回收率均在90%以上。结论所建立的测定大鼠血浆中姜黄素含量的方法简单可行、准确可靠,适用于姜黄素的血药浓度监测。【关键词】RPHPLC法;姜黄素;血浆;含量测定 【Abstract】ObjectiveTodevelopaRPHPLCmethodforthedeterminationofcurcumininratsplasma.MethodAftertheplasmawastreated,thesampleswereseparatedwellonaDiamonsilC18column(4.6mm×250mm,5μm)unde
3、rroomtemperature;themobilephasewasacetonitrile:2%aceticacid11solution(58∶42)ataflowrateof1.0ml/min;thedetectivewavelengthwas426nm.ResultsCurcumincouldbesuccessfullyseparatedfrominternalstandardsubstanceandotherendogenousinterferencecomponentsunderthechromatographicconditions.Liquidliquidextractionm
4、ethodadoptedtotreattheplasmasampleshadthehighestrecoveryrate.Between0.1and0.5mg/L,themethodhadagoodlinearrelationship,whiletheregressionequationwasy=0.0026x-0.0756,r=0.9984;thewithindayandbetweendaysprecisionRSDwerelessthan10%;theaveragemethodrecoveryandtheaverageextractionrecoveryweremorethan90%.
5、ConclusionTheRPHPLCmethodforthedeterminationofcurcumininratplasmaisaccurateandreliable,whichcouldbeappliedtodeterminethecurcuminconcentrationintheblood. 【Keywords】RPHPLCmethod;curcumin;plasma;determination11 姜黄素(curcumin)是姜科植物姜黄或郁金的根茎中提取出来的一种酚类物质,具有抗氧化、抗炎、降血脂、抗动脉粥样硬化、抗肿瘤等广泛的药理活性,且毒性低。近年来,国内外的学者对
6、其进行了深入研究。在治疗癌症方面,国内外进行了大量的临床实验,被公认为是治癌疗效好、毒副作用小和价格低廉的药物,应该说姜黄素非常具有开发的潜能和临床应用价值[1]。本研究旨在建立RPHPLC法测定大鼠血浆中的姜黄素含量,为监测姜黄素口服给药后在大鼠体内的血药浓度变化和动力学特征提供参考,也为其新制剂的设计和临床应用提供理论基础和方法。 1仪器与试药 高效液相色谱仪(日本岛津);Y1型涡旋振荡器(北京长安仪器厂);TGL16G台式高速离心机(上海医用分析仪器厂);AdventurerTMAR1140型电子天平(美国Ohauscorp公司);姜黄素(Sigma,含量95%);甲醇、乙腈(
7、色谱纯);其他试剂为分析纯。Wistar大鼠(沈阳药科大学动物中心)。 2方法与结果 2.1色谱条件的确定 2.1.1色谱条件色谱柱:DiamonsilC18柱(250mm×4.6mm,5μm);流动相:乙腈2%冰醋酸(58∶42);流速:1.0ml/min;柱温:室温;检测波长:426nm;进样量:20μl.11 2.1.2专属性在上述色谱条件下,姜黄素峰形良好,3种成分可达到基线分离