rphplc法测定小鼠血浆中蒿甲醚的浓度论文

《rphplc法测定小鼠血浆中蒿甲醚的浓度论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、RPHPLC法测定小鼠血浆中蒿甲醚的浓度论文【摘要】目的建立测定小鼠血浆中蒿甲醚浓度的方法。方法采用RPHPLC法，色谱柱为DiamonsilC18柱（150mm×4.6mm,5μm），流动相为甲醇水（体积比85∶15）；流速为1.0mL/min；检测波长为210nm；柱温为室温。利用甲基叔丁基醚对小鼠血浆及组织中蒿甲醚及蒿乙醚进行提取后进行测定。结果蒿甲醚与蒿乙醚的色谱峰分离良好并且出峰时间相近，以蒿乙醚为内标测定血浆中蒿甲醚符合方法学要求，血浆标准曲线在一定范围内线性关系良好（R2=0.9991,n=5）,高、中、低3个浓度的

2、回收率均为97%以上，日内及日间RSD均小于3%。结论建立的方法可简单快速测定蒿甲醚在小鼠血浆中的浓度，为内标法测定蒿甲醚在动物血浆中的浓度提供思路。【关键词】蒿甲醚；蒿乙醚；高效液相色谱法；内标法；血药浓度ContentanalysisofartemetherinmiceplasmabyRPHPLCethodsArtemetherandarteehterinmiceplasmaethyltertbutyletherbeforedetection,thenanalyzedonaDiamonsilC18column（150mm×4.6

3、mm,5μm）.ThemobilephaseconsistedofmethanolL/min.Theandroomtemperatureinationofartemether.ResultsThechromatographicpeaksofartemetherandarteetherilarretentiontimesattheselectedHPLCcondition.Thereetheranalysisorethan96%duringhigh,middleandloether.RSDsofetherinplasmacouldbea

4、nalyzedeasilyandrapidlybytheestablishedHPLCmethod.Keyether;arteether;HPLC;innerstandardmethod;blooddruglevel青蒿素（qinghaosu,.freelether,ARM)近年来颇为引人关注.freelether(B)andarteether(C)1仪器与试药1.1仪器高效液相色谱仪（LC10ATVP泵，SPD10AVP紫外检测器，日本岛津公司），TGL16G高速微型台式离心机（上海医分仪器制造有限公司），802离心机（金坛市

5、荣华仪器制造有限公司），XE,国药试剂集团）。1.3实验动物昆明种小白鼠：沈阳药科大学实验动物中心提供，合格证号：SCXK（辽)2003-008。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱：DiamonsilC18柱（150mm×4.6mm,5μm,迪马科技有限公司）；流动相：甲醇水（体积比85∶15）；流速：1.0mL/min；检测波长：210nm；柱温：室温30℃;进样量：20μL。2.2血浆样品的处理取昆明种小鼠数只，摘眼球后取血于涂有肝素的小试管内，取离心后的上层血浆250μL于10mL具塞试管内，分别加入6.32mg/mL的蒿甲醚甲醇

6、溶液20μL,63.2mg/mL的蒿甲醚甲醇溶液5μL,15μL。涡旋3min，再加入5mL甲基叔丁基醚涡旋3min,3500r/min下离心3min后取上清液3mL，氮气吹干，用甲醇150μL溶解，进样20μL，记录峰面积。2.3方法专属性从图2可见，蒿甲醚与蒿乙醚的出峰时间分别为6.5min和8.28min,两种物质的出峰时间相近，并且都能在10min之前出峰，分离度良好（R=6.14）。2.4血浆中蒿甲醚含量测定标准曲线的制备取3份250μL小鼠血浆，分别加入6.32mg/mL蒿甲醚甲醇溶液10、20、30、40μL和63.2mg

7、/mL蒿甲醚甲醇溶液15μL，15.82mg/mL的内标蒿乙醚20μL，以蒿甲醚与蒿乙醚峰面积的比值为横坐标，蒿甲醚在小鼠血浆中的浓度为纵坐标作图得内标法的线性关系曲线，y=243.44x+4.152，R2=0.9991，线性范围0～3.792mg/mL。A.甲醇溶液中蒿甲醚(ARM)与蒿乙醚(ARE)的色谱图B.提取后的空白血浆色谱图C.提取后的空白血浆中添加蒿甲醚与蒿乙醚后的色谱图D.甲醇溶液中青蒿素(QHS)与蒿甲醚的色谱图图2高效液相色谱图（略）Fig.2HPLCchromatograms2.5提取回收率按“2.1.2”项下处理

8、血浆样品后，高、中、低3个浓度的蒿甲醚在小鼠血浆中的提取回收率(n=3)分别为(84.8±1.6)%，(83.5±1.1)%，(73.0±2.9)%。2.6方法回收率分别量取250μL小鼠血浆，精密加入6.