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时间:2018-07-15
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1、HPLC法测定人血浆中萘普生浓度【摘要】目的建立高效液相色谱法测定萘普生血药浓度的方法。方法采用HPLC法测定普生缓释片中萘普生的血浆药物浓度。大连依利特HypersilODS(5μm,4.6mm×250mm)柱,柱温40℃;流动相为甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(50mmol/L磷酸二氢钠水溶液,含0.3%三乙胺,用磷酸调pH值为3.7)=68.9∶31.1;流速1.0ml/min。紫外检测波长为230nm。结果萘普生在0.93~93.20μg/ml线性关系良好,r�2=�0.9999�,最低检测浓度为0.10μg/ml。结论本法快速、灵敏,适用于
2、萘普生血药浓度的监测。【关键词】萘普生;高效液相色谱法DeterminationofNaproxeninthehumanplasmabyHPLCKANGJun-min.ThePeople’SHospitalofShaoshang,XiangtanHunan411300,China【Abstract】ObjectiveToestablishanHPLCmethodforthedeterminationofnaproxeninthehumanplsamw.MethodsTheconcentrationsofNaproxenweredetermin
3、edbyHPLC.ThechromatographiccolumnwasHypersilODS(5μm,4.6mm×250mm)andthetemperature5was40℃.Themobilephasewasmethanol-SodiumDihydrogenPhosphatebuffersolution(50mmol/LSodiumDihydrogenPhosphate,contain0.3%TEA,usephosphoricacidadjustpHwas3.7)=68.9∶31.1ResultsTherangeofnaproxen0.9
4、3~93.20μg/ml,r�2=�0.9999�,thelowestdetermineconcentrationwas0.10μg/ml.ConclusionThemethodisrapid、sensitiveandefficient.Itappliestodeferminenaproxeninplasma.【Keywords】Naproxen;HPLC萘普生(Naproxen)为苯丙酸类非甾体镇痛药,其吸收迅速、起效快、毒副反应小、作用时间长。肠溶胶囊由于胃内药物浓度低,从而减少对胃的直接损害作用。为了有效测定萘普生的药动学,我们在参考文
5、献的基础上采用作了适当改进,建立了HPLC法测定人血浆中萘普生浓度的方法,现报告如下。1仪器与试药1.1实验药品与试剂试验药:萘普生胶囊,杭州康恩贝制药有限公司,批号:030201,规格:萘普生每片125mg。参比药:萘普生片,成都锦华药业有限责任公司生产,批号:030504,规格:每片1255mg。萘普生标准对照品:由海南惠普森医药生物技术有限公司生产提供;地西泮标准对照品,购自国家麻醉品实验室。甲醇:HPLC级,天津科密欧化学试剂开发中心。其他试剂均为国产分析纯。水为自制重蒸水。1.2仪器Agilent1100高效液相色谱仪(Agilen
6、t1100VWD紫外检测器),离心机(赛特湘仪离心机仪器有限公司),旋涡震荡仪(上海琪特分析有限公司)2方法与结果2.1色谱条件固定相:大连依利特HypersilODS(5μm,4.6mm×250mm)柱,柱温40℃;流动相:甲醇:磷酸二氢钠缓冲液(50mmol/L磷酸二氢钠水溶液,含0.3%三乙胺,用磷酸调pH值为3.7)=68.9∶31.1;流速1.0ml/min。紫外检测波长为230nm。2.2血样处理方法精密取血浆0.1ml(用前摇匀,离心),加内标(地西泮,0.34mg/ml)10μl,混匀,加入乙腈0.3ml,旋涡震荡2min,于
7、10000r/min,离心5min,取上层清液,进样10μl,用内标法以峰面积定量。2.3色谱行为图1分别为空白血浆、对照品溶液、含对照品的血浆以及受试者血样的典型色谱图。从图中可以看出,血浆中内源性物质不干扰测定,萘普生与血浆杂质分离较好,萘普生和内标的保留时间分别为5.6、7.2min。2.4线性范围和最低检测浓度5取一定量空白血浆,加入萘普生的对照溶液,依次配制成萘普生浓度为0.93、2.33、4.66、11.65、23.30、46.60、93.20μg/ml的一系列标准血浆,按样品处理项下操作,内标法定量,以待测物浓度对其峰面积与内标
8、峰面积之比进行线性回归,得标准曲线方程为:Y=0.0577X-0.0056(r2=�0.9999�)。以S/N>3,确定最低检测浓度为0.10μg/ml。根据标准曲
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