ppgalnact2反义rna对胃癌细胞sgc7901生物学特性的影响

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1、ppGalNAcT2反义RNA对胃癌细胞SGC7901生物学特性的影响作者：金美芳，邵雪军，吴士良【摘要】目的：研究人胃癌细胞SGC7901中多肽N乙酰氨基半乳糖转移酶2(ppGalNAcT2)基因表达与肿瘤转移相关基因MMP2，TGFβ1表达的相关性，以及对细胞增殖和形态生物学特性的影响。方法：用两个已构建好的反义表达载体转染胃癌细胞SGC7901，通过Ｇ418筛选，建立一系列旨在封闭胃癌细胞SGC7901ppGalNAcT2基因表达的亚细胞克隆。通过共聚焦显微镜，RTPCR检测反义封闭ppGalNAcT2基因RNA表达后，胃癌细胞SGC7901中TGFβ1，

2、MMP2表达水平，细胞增殖以及形态的变化。结果：反义封闭ppGalNAcT2基因表达后,胃癌细胞SGC7901ppGalNAcT2的表达水平明显降低，细胞的形态发生改变，分裂增殖减慢。结果还显示，反义封闭ppGalNAcT2基因表达可使TGFβ1，MMP2基因在mRNA表达水平均增加，提示ppGalNAcT2基因表达可能对胃癌细胞SGC7901浸润转移产生影响。结论：ppGalNAcT2可能在肿瘤的增殖、浸润和转移中发挥作用。【关键词】SGC7901细胞；多肽N乙酰氨基半乳糖转移酶;基质金属蛋白酶;转化生长因子β111［Abstract］Objectiv

3、e:TostudytheeffectonthecellproliferationandthelevelofMMP2andTGFβ1intheSGC7901cellscausedbyantisenseblockingppGalNAcT2geneexpressionMethods：TheantisenseexpressingvectorsoftwodifferentlengthppGalNAcT2genesegmentswereconstructedandtransfectedintoSGC7901cells.Aseriesofsubcellularclonesaiming

4、atblockingofppGalNAcT2geneexpressionofSGC7901cellswereestablishedbyG418selection.Afterantisenseblocking,thecellswerefirsttestedwithfluorescentmicroscopy.ThentheexpressionofppGalNAcT2，MMP2andTGFβ1genecellsgrowthwerestudiedwithRTPCR.TheeffectsofppGalNAcT2antisenseRNAontheproliferationofSG

5、C7901cellsweretestedbyMTT.Results：TheresultsshowedthatppGalNAcT2levelinSGC7901cellswasobviouslyredudcedandthecellproliferationwasslowerafterantisenseblocking.ItindicatedthattheblockingofppGalNAcT2geneexpressionhadinfluenceonSGC7901cellproliferation.ItwasalsorevealedthattheblockingofppGal

6、NAcT2geneexpressioncouldincreasethemRNAandproteinlevelofMMP2andTGFβ1.Conclusion：TheresultsuggeststhatppGalNAcT2hasanimportantroleinthecellproliferation,invasionandmetastasisofcancer.11［Keywords］SGC7901cell;polypeptideNacetylgalactosaminyltransferase;matrixmetalloproteinase;transforminggr

7、owthfactorβ1糖蛋白的糖链按照其连接方式的不同，分为两大类：一类称N连接型糖链，又称N聚糖，主要存在于血浆蛋白和细胞膜及胞质的糖蛋白中。另一类称O连接型糖链，又称O聚糖，主要见于分泌液中的糖蛋白，俗称黏蛋白［1］。肿瘤细胞含有富含O聚糖结构域的膜结合黏蛋白类糖蛋白，这些糖蛋白的基因表达具有细胞特异性并且在肿瘤细胞中常发生变异。有关糖基转移酶的研究，以往人们较多地关注参与N糖苷键连接有关的酶，近年来随着O糖基化相关酶新基因的发现和克隆，有关O糖基化产生的