反义survivin诱导胃癌sgc7901细胞凋亡及逆转耐药的研究

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1、反义survivin诱导胃癌SGC7901细胞凋亡及逆转耐药的研究中国普外基础与临床杂志2007年1月第14卷第1期ChinJBasesClinGeneralsurg,Vol?14,N0?1,Jan?2o.7.63.【文章编号】1007—9424(2007)01—0063—05基础与实验研究反义survivin诱导胃癌SGC7901细胞凋亡及逆转耐药的研究△陈曦海张岂凡马荣【摘要】目的探讨生存素(survivin)反义核酸(anti-pcDNA3-svv)对胃癌细胞SGC7901的凋亡诱导,对泰索帝的化疗增敏作用及降低多药耐药基因一1(MDR-

2、1)表达的作用.方法采用脂质体法转染SGC7901细胞,并筛选阳性克隆,Westernblot检测survivin蛋白的表达,RT-PCR检测MDR-1mRNA的表达,透射电镜观察转染后对SGC7901细胞的凋亡诱导作用,MTT法检测转染细胞对泰索帝的敏感性.结果survivin蛋白的表达在重组质粒组比空质粒组和空白对照组明显降低(P<O.05),重组质粒组MDR一1mRNA表达也较其他2组明显降低(P<0.01);透射电镜下可见重组质粒组细胞呈凋亡晚期变化,其MDR指数为0.196±0.013,明显低于空质粒组的2.958士0.0

3、24和空白对照组的3.126±0.019(P<O.01);重组质粒组对泰索帝的ICs.值为(16.7±1.98)ng/ml,也明显低于空质粒组的(49.9士1.21)ng/ml和空白对照组的(55.7±1.89)ng/ml(P<0.01).结论survivin反义核酸可诱导SGC7901细胞凋亡,增强泰索帝化疗敏感性,可能逆转耐药.【关键词】生存素反义凋亡泰索帝多药耐药基因【中图分类号】R735.2【文献标识码】AEffectsofSurvivinAntisenseRNAonApoptosisandReversingDrugResi

4、stanceofsIGC7901CellsCHENXi—hal.ZHANGOi—fan,MARong.TheFourthAffiliatedHospita1.HarbinMedicalUniversity.Harbin150001.China[Abstract]ObjectiveTostudytheeffectsofsurvivinantisenseRNAonSGC7901cell'sapoptosisandchem—osensitivitytotaxotere,andtoinvestigateitseffectontheexpressiono

5、fmulti—drugresistancegen~l(MDl1).MethodsSurvivinantisenseeukaryoticvectoranti-pcDNA3一SVVwastransfectedintoSGC7901celllinesbylipo—fectamineandpositivecloneswerescreenedoutthen.SurvivinproteinandMDR一1mRNAweremeasuredbywest—ernblotandRT—PCR.respectively.Apoptosisthatwasinducedb

6、yanti—pcDNA3一SVVwasobservedbyelectronicmi—croscope,andthesensitivityofSGC7901celltotaxoterewasexaminedbyMTT.ResultsTheexpressionsofsur—vivinproteinandMDl1mRNAintransfectedSGC7901cellsbothdecreasedmoresignificantlythanthatofnon-transfectedcells(P<O.05,P<O.01),andtheindi

7、cesofMDRoftransfectiongroupandnon-transfectiongroupwere0.196士O.013and3.126士0.019,respectively,atthelatephaseofapoptosis.whichhadflsignificantdiffer—encebetweeneachother(P<O.01),IC5oofthetransfectedcellstotaxoterewas(16.7士1.98)ng/mlandthatofthenon-transfectedcellswas(55.7士

8、1.89)ng/ml,whichalsohadflsignificantdifference(P<O.01).ConclusionSuriviv