survivin反义核酸诱导卵巢癌细胞凋亡及逆转多西他赛耐药机制的实验研究(1)

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1、Survivin反义核酸诱导卵巢癌细胞凋亡及逆转多西他赛耐药机制的实验研究(1)作者：马荣，陈曦海，唐丽萍，耿晓星，张云艳，张英蕾，王晶　　【关键词】Survivin反义核酸；卵巢肿瘤；凋亡；多西他赛；多药耐药基因　　ExperimentalstudyonapoptosisofovariancancercellsandreversaldocetaxeldrugresistanceinducedbySurvivinantisenseRNA　　【Abstract】AIM:ToestablishSurvivinantisenseRNAande

2、xploreitseffectontheapoptosisofovariancancercellsandthesensitivitytodocetaxelanditsmechanismofreversingdocetaxeldrugresistance.METHODS:SurvivinantisenseeukaryoticvectorwastransferredintoSkov3cellsbyelectroporationandpositiveclonewasscreenedout.Survivinproteinwasdetectedb

3、yWesternblot;effectofapoptosisinducementwasobservedbyflowcytometry;sensitivitytodocetaxelwasexaminedbyMTT;expressionofMDR1mRNAwasdetected.RESULTS:Survivinproteinofpositivelyclonedcellswerereducedobviouslyascomparedwiththatofnontransferedcells.Terminalapoptoticchangewasob

4、servedbyflowcytometryandtheapoptosisratewas19%;IC50ofexperimentalgrouptodocetaxelwas（±）ng/mLandcontrolgroupwasng/mL,sothestatisticaldifferencewassignificant.ExpressionofMDR1mRNAofSkov3SVVantigroupwasreducedobviouslyascomparedwiththatofSkov3group.CONCLUSION:Survivinantise

5、nseRNAcaninduceovariancancercellapoptosisandincreasethesensitivitytodocetaxelbyreducingtheexpressionofMDR1mRNA.　　【Keywords】survivinantisenseRNA;ovarianneoplasms;apoptosis;docetaxel;MDR1　　【摘要】目的:构建Survivin反义真核表达载体（antipcDNA3svv），探讨其对卵巢癌的凋亡诱导作用、对多西他赛的化疗增敏作用及逆转耐药的机制.方法：采用Su

6、rvivin反义核酸瞬时电转染法转染卵巢癌细胞系Skov3,筛选出阳性细胞株.以Westernblot检测Survivin蛋白的表达，用流式细胞仪检测其对Skov3的凋亡诱导作用，采用MTT法检测其对多西他赛的化疗增敏作用，并检测实验组细胞（Skov3SVVanti）MDR1mRNA的表达.结果：稳定表达antipcDNA3svv的Skov3SVVanti其Survivin蛋白表达比未转染者明显降低，Skov3SVVanti组细胞流式细胞仪检测显示其凋亡率为19%，对多西他赛的IC50值为（±）ng/mL,而对照组（Skov3）为ng/

7、mL，差异具有明显的统计学意义.Skov3SVVanti组MDR1mRNA表达较Skov3组明显减少（P　　【关键词】Survivin反义核酸；卵巢肿瘤；凋亡；多西他赛；多药耐药基因　　　　0引言　　上皮性卵巢癌是常见的妇科肿瘤，具有易转移及复发的特性，因此手术后化疗是卵巢癌规范化治疗最重要的内容之一.多西他赛（docetaxel）又名泰索帝是治疗卵巢癌的新药，其联合铂类治疗卵巢癌临床缓解率远高于铂类联合其他化疗药.但是对于一些复发和多处转移的患者，多西他赛也产生了耐药现象.Survivin是新近发现的IAP家族成员，能抑制caspas

8、e活性而发挥抗凋亡作用.已有研究证实［1］，Survivin基因的高表达与化疗耐药有密切关系，抑制Survivin基因的表达能增加肿瘤组织对化疗的敏感性，对于维持正常细胞生物学特性具有重要作用［2］.本研究