survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对

survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对

ID:23172772

大小:55.50 KB

页数:8页

时间:2018-11-05

survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对_第1页
survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对_第2页
survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对_第3页
survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对_第4页
survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对_第5页
资源描述:

《survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库

1、survivin反义寡核苷酸诱导胃癌细胞凋亡及对【摘要】目的探讨生存素(survivin)反义寡核苷酸(antisenseoligonucleotide,ASODN)对人胃癌细胞株SGC7901的凋亡诱导、对多西他赛的化疗增敏作用。方法设计合成特异性靶向survivinASODN。将胃癌细胞株分为空白对照组(Sham组)、单纯脂质体对照组(Lip组)、正义寡核苷酸转染对照组(Lip-SODN组)、ASODN转染组(Lip-ASODN组)。转染48h后,TT法检测转染细胞对多西他赛的敏感性。结果脂质体介导survivi

2、nASODN转染后的胃癌细胞survivin蛋白表达明显下降,细胞凋亡率明显高于各对照组(P<0.05),对多西他赛的IC50值明显低于各对照组(P<0.05),细胞生长抑制率明显高于各对照组(P<0.05)。结论survivinASODN转染胃癌细胞能下调survivin蛋白表达,诱导胃癌细胞凋亡,抑制细胞增殖,增强多西他赛化疗敏感性。【关键词】生存素;反义寡核苷酸;胃癌细胞;凋亡;多西他赛;增敏作用  Abstract:ObjectiveToinvestigatetheeffectsofsurv

3、ivinantisenseoligonucleotide(ASODN)ontheapoptosisandchemosensitivitytodocetaxelofthehumangastriccarcinomacelllineSGC7901.MethodsASODNtargetingsurvivinacellsgroup,lipofectingroup,senseoligonucleotide(SODN)groupandantisenseoligonucleotide(ASODN)group.Aftertransfe

4、ctionfor48h,theexpressionlevelofsurvivinineachgroupinedbyfloetry;andthesensitivityofSGC7901cellstodocetaxelinedbyMTT.ResultsTheexpressionofsurvivininSGC7901cellsacellscandoayhelptoreversedrugresistance.  Keyorcell;apoptosis;docetaxel;chemosensitivity  生存素(survi

5、vin)属于凋亡抑制蛋白(inhibitorofapoptosisprotein,IAP)家族中的新成员,它可以通过有丝分裂促进细胞增殖,抑制细胞凋亡。凋亡是化疗药物诱导肿瘤细胞死亡的主要模式,survivin在调节肿瘤细胞凋亡敏感性方面起着核心作用。本实验采用脂质体介导survivin反义寡核苷酸(survivinASODN)转染人胃癌细胞SGC7901,以封闭survivin基因的表达,观察其对胃癌细胞SGC7901的凋亡诱导以及对化疗药物多西他赛的化疗增敏作用。  1材料和方法  1.1材料胃癌细胞株SGC79

6、01购于中国科学院细胞生物研究所。survivin反义寡核苷酸、错配寡核苷酸(与反义寡核苷酸相同碱基组成、不同排列顺序)由上海生工生物工程公司合成,两端3个碱基经硫代修饰以对抗核酸酶的降解;反义寡核苷酸为5′-CCCAGCCTTCCAGCTCCTTG-3′,错配寡核苷酸为5′-GCCACTCCTCGACTCTCGTC-3′。阳离子脂质体Lipofectin购于Invitrogen公司。survivin抗体及辣根过氧化物酶(HRP)标记的第二抗体购于SantaCruz公司,RPMI1640购于Invitriogen公司

7、,小牛血清购于杭州四季青公司,多西他赛购于AventisPharmaDagenham公司。  1.2方法  1.2.1细胞株培养人胃癌细胞株SGC7901用含10%小牛血清的RPMI1640培养基,在37℃、5%CO2的饱和湿度条件下培养。  1.2.2细胞分组及转染取对数生长期的SGC7901,传代接种于6孔培养板内,调整细胞密度,使每孔的细胞数为3×105,常规条件下培养24h,显微镜下观察,约80%细胞融合时开始实验。设置空白对照组(Sham组)、单纯脂质体对照组(Lip组)、正义寡核苷酸转染对照组(Lip-S

8、ODN组)和反义寡核苷酸转染组(Lip-ASODN组),每组设3个复孔。细胞转染过程按转染试剂盒说明书进行,转染12、24、48h后收集各组细胞用于后续实验。  1.2.3TT法检测各组细胞对多西他赛的敏感性收获的各组细胞用含10%小牛血清的RPMI1640重悬,倒置显微镜计数细胞,调整细胞密度为1×105/L,并接种于96孔板内,每组设置7个

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。