survivin反义寡核苷酸激活caspase-3诱导sgc7901胃癌细胞凋亡的实验研究

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1、survivin反义寡核苷酸激活caspase-3诱导SGC7901胃癌细胞凋亡的实验研究【摘要】目的研究转染生存素(survivin)反义寡核苷酸诱导SGC7901胃癌细胞凋亡及其可能的作用机制。方法实验分为空白对照组(Control组)、脂质体组（Lip组）、正义寡核苷酸组（Sodn组）及反义寡核苷酸组(Asodn组)。人工合成正、反义寡核苷酸，经脂质体将survivin正、反义寡核苷酸转染入胃癌细胞48h后，MTT检测细胞增殖抑制率，Westernblot检测caspase-3蛋白表达改变，Hoechst染色观察细胞凋亡形态

2、改变及流式细胞仪检测凋亡率。结果Hoechst染色荧光显微镜下Control组、Lip组及Sodn组细胞核呈正常的蓝色，而Asodn组细胞核染色增强、核质浓缩、核碎裂，呈凋亡改变；Asodn组细胞增殖抑制率、细胞凋亡率、caspase-3蛋白表达均增高，与Control组、Lip组及Sodn组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论survivin反义寡核苷酸可诱导胃癌细胞凋亡，其作用机制可能是通过激活caspase-3表达，启动凋亡信号传导。【关键词】生存素；反义寡核苷酸；caspase-3；胃癌细胞；凋亡Abstra

3、ct:ObjectiveToinvestigatetheeffectoftransfectedsurvivinantisenseoligonucleotideoninducingapoptosisingastriccancercellsandthepossiblecausativemechanism.MethodsTheexperimentincludedfourgroups:control,liposome9(Lip),senseoligonucleotide(Sodn)andantisenseoligonucleotide(A

4、sodn).Artificiallysynthesizedsurvivinantisenseoligonucleotidewastransfectedfor48hoursintogastriccancercellsusingliposome.Aftercultivation,thecellproliferationinhibitionratewasevaluatedbyMTTassay,theexpressionofcaspase-3proteinwasdeterminedwithWesternblot,andthemorphol

5、ogicalchangesofapoptosiswereobservedbyHoechststaining,andtheapoptosisratewastestedwithAnnexinv-FITCassayofflowcytometricanalysis.ResultsFluorescencemicroscopicobservationsrevealedthatHoechststaininginthecontrol,LipandSodngroupshadnucleuspresentedasnormalblue,whiletheA

6、sodngrouphadsuchchangesasreinforcednucleusstaining,karyoplasmconcentration,karyorrhexisandapoptoticmodifications.Asodngrouphadasignificantincreaseinthecellproliferationinhibitionrate,cellapoptosisrateandexpressionofcaspase-3protein,comparedwiththecontrol,LipandSodngro

7、ups.Thedifferenceshadstatisticalsignificance(P<0.05).ConclusionSurvivinantisenseoligonucleotidecaninduceapoptosisofgastriccancercells,Itspossiblemechanismmightbethattheapoptosissignaltransductionisinitiatedbytheactivationofcaspase-3expression.9Keywords:survivin;ant

8、isenseoligonucleotide;caspase-3;gastriccancercell;apoptosis英文已换生存素(survivin)是近期发现的一种凋亡抑制蛋白家族成员，也是迄今发现的作用最强的凋亡抑制因子，survivin的过