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1、NKG2D配体的表达直接影响NK细胞对不同发育阶段DC的杀伤作者：涂三芳,郭坤元,胡亮衫,梅家转,周健,孙明【摘要】 目的:探讨NKG2D配体在不同发育阶段树突状细胞（DC）表面的表达及其对自然杀伤（NK）细胞杀伤活性的影响。方法:用细胞因子（rhIL-4、rhGM-CSF、TNF-α）体外诱导培养单核细胞来源的未成熟树突状细胞（iDC）和成熟树突状细胞（mDC）并鉴定形态和表型,免疫磁珠法分离纯化NK细胞。流式细胞术（FCM）检测iDC和mDC表面NKG2D配体MICA/B、ULBP1-3的表达。用LDH释放法检测NK细胞对iDC和mDC的杀伤活性以及抗NKG2D单克隆抗体(mAb)阻断N
2、K细胞后的杀伤活性。结果:培养的iDC和mDC具有典型的细胞形态和免疫表型特征。iDC表面表达MICA、MICB、ULBP1、ULBP3,表达率分别为(32.39±8.30）%、(17.75±3.40)%、(26.71±6.48)%、(38.37±6.89)%;mDC表面表达MICA、ULBP3,表达率分别为(7.82±2.67)%、(8.36±2.42)%,比iDC表面相应配体表达率低（P<0.01）。各效靶比NK细胞对iDC的杀伤活性均比对mDC的杀伤活性高,差异有统计学意义(P<0.01)。抗NKG2DmAb阻断NK细胞后对iDC杀伤活性比阻断前减弱(P<0.05);对
3、mDC的杀伤活性与阻断前相比无统计学意义(P>0.05)。结论:NKG2D配体在iDC表面表达高,介导了NK细胞对iDC的杀伤,而对mDC的杀伤无影响,是NK细胞对iDC选择性高杀伤的分子机制之一。13【关键词】NKG2D配体自然杀伤细胞树突状细胞 ［Abstract］AIM:ToinvestigatetheexpressionofNKG2Dligandsondendriticcells（DC）atdifferentdevelopmentstagesanditseffectoncytotoxicityofnaturalkiller（NK）cells.METHODS:Themonocyt
4、eswereculturedintoimmaturedendriticcells（iDC）andmaturedendriticcells（mDC）withcytokines.NKcellswereobtainedfromnormalperipheralbloodbyCD56antibodymagneticisolation.TheexpressionofNKG2Dligands(MICA/B,ULBP1-3)wasdetectedbyflowcytometry.CytotoxicityofNKcellsandtheNKcellsblockedwithanti-NKG2DmAbsagainsti
5、DCandmDCwastestedusingLDH-releasingmethod.RESULTS:IDCandmDCwereoftypicalmorphologyandphenotypes.MICA,MICB,ULBP1,andULBP3wereexpressedoniDCandtheirexpressionratewas(32.39±8.30)%,(17.75±3.40)%,(26.71±6.48)%,(38.37±6.89)%,respectively.MICAandULBP3wereexpressedonmDCandtheirexpressionratewas(7.81±3.33)%a
6、nd(8.36±2.42)%,respectively,whichwaslowerthanthatonmDC(P<0.01).AttheeachE∶TratiocytotoxicityofNKcellsagainstiDCwasstrongerthanthatagainstmDC(P<0.01).cytotoxicityofNKcellsblockedwithanti-NKG2DmAbagainstiDC13wasdecreasedcomparedwiththatofNKcellsunblocked(P<0.05)whilecytotoxicityofNKcellsblock
7、edwithanti-NKG2DmAbagainstmDCshowednodecreasecomparedwiththatofNKcellsunblocked(P>0.05).CONCLUSION:TheexpressionofNKG2DligandsoniDCishigherthanthatonmDC,whichplaysanimportantroleinthecytotoxiceffec
