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1、NKG2D配体的表达直接影响NK细胞对不同发育阶段DC的杀伤的论文【摘要】 目的:探讨nkg2d配体在不同发育阶段树突状细胞(dc)表面的表达及其对自然杀伤(nk)细胞杀伤活性的影响。方法:用细胞因子(rhil-4、rhgm-csf、tnf-α)体外诱导培养单核细胞来源的未成熟树突状细胞(idc)和成熟树突状细胞(mdc)并鉴定形态和表型,免疫磁珠法分离纯化nk细胞。流式细胞术(fcm)检测idc和mdc表面nkg2d配体mica/b、ulbp1-3的表达。用ldh释放法检测nk细胞对idc和mdc的杀伤活性以及抗nkg2d单克隆
2、抗体(mab)阻断nk细胞后的杀伤活性。结果:培养的idc和mdc具有典型的细胞形态和免疫表型特征。idc表面表达mica、micb、ulbp1、ulbp3,表达率分别为(32.39±8.30)%、(17.75±3.40)%、(26.71±6.48)%、(38.37±6.89)%;mdc表面表达mica、ulbp3,表达率分别为(7.82±2.67)%、(8.36±2.42)%,比idc表面相应配体表达率低(p<0.01)。各效靶比nk细胞对idc的杀伤活性均比对mdc的杀伤活性高,差异有统计学意义(p<0.01)。抗n
3、kg2dmab阻断nk细胞后对idc杀伤活性比阻断前减弱(p<0.05);对mdc的杀伤活性与阻断前相比无统计学意义(p>0.05)。结论:nkg2d配体在idc表面表达高,介导了nk细胞对idc的杀伤,而对mdc的杀伤无影响,是nk细胞对idc选择性高杀伤的分子机制之一。.cOm【关键词】nkg2d配体自然杀伤细胞树突状细胞 expressionofnkg2dligandsondendriticcellsatdifferentdevelopmentstagesanditseffectoncytotoxicityofn
4、kcells tusan-fang,guokun-yuan*,huliang-shan,meijia-zhuan,zhoujian,sunming departmentofhematology,zhujianghospital,southernmedicaluniversity,guangzhou510282,china [abstract]aim:toinvestigatetheexpressionofnkg2dligandsondendriticcells(dc)atdifferentdevelopmentstagesan
5、ditseffectoncytotoxicityofnaturalkiller(nk)cells.methods:themonocytesmaturedendriticcells(idc)andmaturedendriticcells(mdc)normalperipheralbloodbycd56antibodymagicisolation.theexpressionofnkg2dligands(mica/b,ulbp1-3)etry.cytotoxicityofnkcellsandthenkcellsblockedabsagain
6、stidcandmdcethod.results:idcandmdcorphologyandphenotypes.mica,micb,ulbp1,andulbp3icaandulbp3dcandtheirexpressionratedc(p<0.01).attheeache∶tratiocytotoxicityofnkcellsagainstidcdc(p<0.01).cytotoxicityofnkcellsblockedabagainstidcabagainstmdcshodc,portantroleinthecyt
7、otoxiceffectofnkcellsagainstidc,buthasnoeffectonthataginstmdc.nkg2d-nkg2dligandsshooleculermechanismsthatnkcellskillidcselectivly. [keyi1640培养基和胎牛血清购自gibco公司。重组人白细胞介素-4(rhil-4)、重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhgm-csf)和肿瘤坏死因子(tnf-α)均为peprotech公司产品。抗cd56免疫磁珠抗体、macs磁柱和macs细胞分选仪均为milt
8、enyi公司产品。杀伤活性检测试剂盒(cytotox96non-radioactivecytotoxocityassay)为promega公司产品。cd3fitc、cd16pecd56pemab为bd公司产品。fitc或pe标记的鼠抗