高产琼胶酶菌株的选育和产酶的研究-水产品加工及贮藏工程专业论文

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1、优秀毕业论文中国海洋大学硕士学位论文高产琼胶酶菌株的选育和产酶的研究姓名：汤海青申请学位级别：硕士专业：水产品加工及贮藏工程指导教师：管斌20040601精品参考文献资料优秀毕业论文高产琼胶酶菌株的选育和产酶的研究摘要本文从青岛沿海的红藻中筛选获得一株琼胶酶高产菌株AT-22，经鉴定属于假单胞菌属(Pseudomonas)，暂命名为Pseudomonassp．StrainAT-22。该菌的生长温度范围为20～40。C，生长的pH范围为5．O～9．0，该菌的生长不需要海水或NaCI，但2．0～4．0％的NaCI对其生长有利。对于琼胶、褐藻胶和淀粉

2、均具有降解作用，而对纤维素、几丁质、卡拉胶和木聚糖等无作用。通过紫外诱变和化学诱变提高了菌株Pseudomonassp．AT-22的产酶性能。进一步通过对Pseudomonassp．AT一22发酵条件的研究，确定最佳产酶发酵培养基组成为：琼胶底物浓度0．3％、硫酸铵0．5％、蛋白胨0．3％、氯化钠3．O％、磷酸二氢钾0．1％、氯化镁0．1％：最佳发酵条件为：发酵温度24℃、培养基pH7．0、300ml三角瓶中培养基装量lOOml、接种量1％。在上述培养条件下，48h摇瓶中发酵液的最高酶活力达到800U／mL。该琼胶酶是一种诱导型的胞外酶，在琼胶

3、发酵培养基中加入小分子糖，如半乳糖、葡萄糖以及琼胶的降解物时，AT一22优先利用小分子糖，生长旺盛，产酶受到抑制。其中，半乳糖和蔗糖对AT一22的产酶抑制作用较强。对其理化性质进行研究，该酶最适反应温度为40。C，最适反应pH为7．0，酶在50℃以上易失活，在pH6．O～7．0的范围内，有较好的稳定性。最适底物浓度1．O～1．2％。K+和ca2+离子对酶促反应有促进作用，而Fe”、Mn”、zn”、和Pb”等离子有不同程度的抑制作用。该酶的Km为0．53mg／mL。关键词：琼胶降解菌；琼胶酶；酶学性质；诱变选育精品参考文献资料优秀毕业论文Stud

4、ysonthebreedingofagaraseoverproductionstrainandtheconditionsofagaraseproductionAbstractAnagar-decomposingstrainwasisolatedfromsomekindsofredagarinthecostalwaterinQingdao．andpresumptivelyclassifiedwithinthegenusPseudomonas．1tgrowsatanoptimUlTItemperatureof20～40"CandapHof5．0～9

5、．0．NaCIorseawaterarenotstrictlyrequiredforgrowth，but2．O～4．0％NaClishelpful．Besidesag骂PseudomonasS仕ainAT-22carlalsodegradecarboh)，dratessuchasalginateandstarchThisoriginalstrainWastreatdrepeatedly、^，itllvariousmutagens(UV,EMS)inscmemnghighproducerofagarse，andthemutantwithhi【gh

6、andstableyieldofagaraseisselectedafterrepeatednaturalselection，Withthesinglefhctortestandrelationshiptest。theoptimalculturemediaforAT-22s廿ainproducingagaraseisdecidedas：agarO．3％，(NI％)2S040．5％，peptone0．3％，NaCl3．O％，KH2P040．1％，MgCl20．1％；andtheoptimalcultureconditionssuchasincub

7、atingtemperature，mediumpH，rotationrateandamountofinoculationare24"(2，7．0，120rpmand1％respectively,300mLEr]enmeyerflaskcontaining100mLmedium．Theagaraseactivityoffermentedbrothis800U／mLwhenPseudomonassp．AT-22isincubatedinErlenmeyerflaskundertheoptimalconditionsat36-48h．Theagara

8、sefromPseudomonassp．AT-22isinducibleandsecretesextracellularly．Exazymeprodu