资源描述：
《m-cs固定化木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的初步研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、M—CS固定化木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶的初步研究王志彬邵阳学院生物与化学工程系湖南邵阳422000指导老师：赵良忠摘要以自制壳聚糖为载体，戊二醛为交联剂,并以Span-80为乳化剂，通过化学共转化法将Fe3O4磁性纳米粒子吸附在壳聚糖微球表面；经活化，得到一种生物亲和性好、分散性好、粒度均匀、表面富含功能环氧基的磁性壳聚糖微球；对木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶固定化，并初步研究了木瓜蛋白酶的用量和固定时间对木瓜蛋白酶固定效果及活性的影响，研究了固定时戊二醛的浓度和固定温度对菠萝蛋白酶固定效果及活性的影响。结
2、果表明：制备微球时，壳聚糖的最佳浓度为3%，戊二醛质量百分数为25%。制备磁性壳聚糖时，适宜操作条件为：在壳聚糖微球中加入摩尔比为1：1的Fe2+和Fe3+的混合溶液，并60℃下浸泡40min，然后加入2mo1／L的NaOH溶液。60℃水浴中反应40min，所得的磁性壳聚糖微球外观为球形、颗粒大小均匀，具有强磁响应性，加酶量为200mg/g载体。固定化木瓜蛋白酶，最适固定温度为5℃,pH为8；固定化菠萝蛋白酶蛋白酶最适温度为23℃，pH为6.0-9.0。酶活回收率为23.7%，固定化酶在热稳定性、
3、pH稳定性和操作稳定性上较游离酶均得到了较大幅度的提高。关键词：磁性壳聚糖；木瓜蛋白酶；菠萝蛋白酶；酶活力18ThestudyofMagneticChitosanImmobilizedTrypsinandBromelainWangzhi-bin(DepartmentofBiologyandChemistryEngineering,ShaoyangUniversity,Shaoyang422000,China)theguidedteacher:Zhaoliang-zhongAbstractSumma
4、rize:ThestudyusedMagneticChitosanasacarrier,GlutaraldehydeasacrosslingkingagentandSpan-80asaemulsifiertoembedthechitosanmicroballoons，andthechitosanmicroballoonsofFe3O4thatpassedbytheobject'ssurfacebysuspengdingcrosslingkingmethod,whichsynthesizedatyp
5、eofMagneticChitosanMicrospheresofahigh-hydrophilic,uniformsize,dispersion.Atthesametime,thesurfaceofcompositionwasfullofFuncionalEpoxy.What'smore,ItalsotookPapainandBromelainasModelEncymetoimmobilizeProtease,andthestudyoftheeffectwhenitimmobilizePapai
6、nandBromelain.TheresultsshowedthatthebestconcentrationofChitosanwas3%,thevolumeofGlutaraldehydewas25%,tomakeMagneticChitosan,thebestconcentrationofFe2+Fe3+Towas1:1,immobilizeTrypsi,themostsuitabletemperaturewas5centigrade,pH8;ToimmobilizeBromelain,the
7、mostsuitabletemperaturewas55centigrade,pHfor6.0-9.0,andtherecoveryofenzymeactivitywas23.7%.ItalsoshowedamoresubstantionalincreasethanFreeEnzymeinthermalstability,pHstabilityandoperationalstability.Keywords:MagneticChitosan;Bromelain;Trypsin;Enezyactiv
8、ity18目录前言31材料与方法41.1材料、试剂、仪器41.1.1材料41.1.2试剂41.1.3仪器设备41.2操作步骤51.2.1壳聚糖微球的制备[5][6]51.2.2磁性壳聚糖微球的制备51.2.3磁性壳聚糖微球的活化51.2.4磁性壳聚糖微球固定木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶因素的影响51.2.5酶活力测定62结果与分析72.1壳聚糖微球制备的影响因素及其结构表征72.2磁性壳聚糖微球制备的影响因素112.3磁性壳聚糖微球的形态112.4酶量的影响132.5戊二醛用量对菠萝蛋白
