eb病毒潜伏膜蛋白2重重组疫苗的构建及其免疫效果的研究研究

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1、中国预防医学科学院博士学位论文EB病毒潜伏膜蛋白2重重组疫苗的构建及其免姓名：朱伟严申请学位级别：博士专业：免疫学指导教师：曾毅;周玲2000.7.1 �绻�懦糏医生Ⅱ‘主：��出盘压墟��苅博士研究生：朱伟严曾种人类疾病有关。／在西方发达国家，主要引起青少年的传染性单核细胞增多症，��，��的病因之～刊��状胃腥救颂搴螅�谔迥谛纬汕狈�腥荆�匾煨韵赴��’淋巴细胞�������，��在控制处于潜伏感染状态的细胞、防止肿瘤发生中起着免疫监督作用。正常人体有针对�病毒感染的细胞免疫反应。而仵�病毒相关疾病中，�病毒的抗原表达和机体产生的

2、��纯鼍�雔�常人有所不同。��颊咧刑匾煨陨鄙薚细胞的功能受到抑制，患者外周血中��特异性细胞免疫功能显著低于一常人群。如果能在�病毒感染阳性者体内持续表达病毒的细胞免疫水平，这种��从Χ灾琢鼍哂性し篮椭瘟萍壑怠�牛～�病毒潜伏膜蛋白����人群中较常见。�虼耍琇��晌T谔迥谟盏糆�《咎匾煨訡�、预防和治々，十¨关肿瘤的良好靶抗原。临床�τ肔��匾煨缘腃�治疗�病毒相天的淋巴 了它们在诱导特异性细胞毒方面的作用。在肿瘤疫苗的研究当中，��葺猈能模拟病原体进入机体的自然状态，激发全面而持久的以细胞免疫为主的免疫反了初步的小鼠免疫试验。结

3、果显示，�病毒的重组核酸疫苗表达质粒可在小鼠体内诱发针对��蛋白的特异性体液免疫和细胞免疫。免疫小鼠血清的抗体检测发现��蛋白诱发体液免疫的能力不强。从��������疫接种�芎螅�刈橹柿Ｃ庖叩男∈蟛��攵訪��奶匾煨訡�均高于空载体免疫小鼠�％一�％以七。在效靶比为�：�保��置庖呒亮康腃�杀伤率为为了建立在体内外将��导入相关细胞的有效方法，我们还构建了邮俩毒�獻�重组逆转录病毒。将�病毒��蛋白的基因重组至逆转录病毒载体通过脂质体将重组质粒导入逆转录病毒的包装细胞系中，通过��筛选抗性克隆，培养抗性细胞，收集上清，获得重组病毒。

4、，将之感染小鼠成纤维细胞����测定病毒滴度为��×���／�，提取转染细胞���蠵�鉴定，结果证实转染细胞的��泻�心康幕�虻奶匾煨云�巍������的结果也显示我们已获得能产生重组��逆转录病毒的包装细胞系。重组�琈�逆转录病毒的建立使我们能将��导入相关细胞，研究它在细胞内的功能，如比较��在淋巴细胞和上皮细胞中的作用等。另外，��能诱导特异性细胞免疫，可运用重组��逆转录病毒感染细胞作为瘤苗刺激人体产生特异性细胞免疫反应。皮肤下有丰富的郎罕氏细胞，能捕捉低浓度的外束抗原引发初次免疫应答。为初步探讨重组��逆转录病毒的应用，我们

5、将重组病毒感��坏腄�免疫剂量和重组��一��病毒进行了联合免疫，并观察了�蹵．次加强免疫、重组��一��ザ烂庖摺⒅刈長��籑�强免疫等几种联合免疫模式的免疫效果。《结果发现重复免疫组的免疫效果要优 ��詅：各疫莳的应用和免疫方式的研究，将有益于我们进⋯步探索抗肿瘢粕：感染���浴�訣�《咎匾煨悦庖叩幕�。�擞肊�相关疫苗能进一步提高机重组逆转录病毒 ��������������������������，��������������������甌��������������������������������猘�������瓵����

6、��������������������������������—����������甋������ 碰�酝��X宜�痹裪虫���飅�����������������������������������������������������������．��������������������������������������������� �����������—��������甈�������������“���������������������������������������������������������������

7、�．����疨�／����������甊���������甌�����．������������������瓵���� ���������珼�� 虫在中国，曾毅院士领导的课题组经二十多年的研究取得了丰硕成果。首先通过血清学普查及前瞻性流行病学研究证实��隢�高度相关“’”，其次在体外建了直接证据””。基本阐明了在��姆⑸�蠩�是病因，机体的遗传和免疫是基础，环境和促癌物起协同作用。在由病毒引起的肿瘤中，机体针对病毒抗原的特异性免疫监督在控制肿瘤发生中起重要作用”��３浞值闹ぞ荼砻鳎琓细胞介导的免疫对控制�病毒感染，尤其是杀灭�病毒感染

8、的�赴�潜匦璧摹皁“”。感染�病毒的健康人体内会染有�病毒的细胞有多种作用机制，在病毒感染周期的不同位置和时相均有特异性细胞免疫的作用。大多数血清阳性的健康者有一个以上针对��乖�腃�免疫，而��固逖粜缘腘�病人体内��