褪黑素和维生素e对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响论文

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1、褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响论文【摘要】目的：探讨褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠肾脏氧化应激的影响。方法：对四氧嘧啶诱导糖尿病模型大鼠给予褪黑素和维生素E治疗14d后，检测各组大鼠肾功能及肾脏氧化应激相关指标的变化。结果：与糖尿病组大鼠相比，褪黑素治疗组肾质量、肾质量/体质量、血清尿素氮显著下降，血清肌酐无明显变化，而维生素E治疗组上述指标均无明显下降。褪黑素和维生素E可明显增加肾脏超氧化物歧化酶（SOD）活性，升高的谷胱甘肽过氧化物酶（GSHPx）活性有所恢复，降低丙二醛（MDA）和一氧化氮（NO）含量，褪黑素组与维生素E组相

2、比差异显著。结论：氧化应激在早期糖尿病大鼠肾脏损害过程中起了重要作用.freelelatonin,MLT)是松果腺合成与分泌的主要激素之一，它又是一具有强有力抗氧化作用的自由基清除剂3。本研究采用维生素E和褪黑素治疗早期四氧嘧啶诱导的糖尿病大鼠，旨在探讨抗氧化剂保护糖尿病大鼠肾脏病变的具体机制。1材料和方法1.1材料1.1.1实验动物雄性SD大鼠38只,由东南大学实验动物中心提供，体质量170210g，23月龄，分笼饲养，实验动物室温度（22±2）℃，相对湿度（50±5）%，光照/黑暗12h交替（06：00开灯，18：00关灯），环境安静，予普通饲料和清

3、洁饮水。1.1.2药物及主要试剂褪黑素、维生素E和四氧嘧啶购自Sigma公司，超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSHPx)、丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、葡萄糖测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。1.2方法1.2.1动物分组及处理大鼠适应性饲养3d后随机分为正常对照（NC）组（8只）和糖尿病（DM）组（30只）。糖尿病组大鼠予四氧嘧啶（临用前以生理盐水避光低温新鲜配制，质量浓度为40g·L-1）200mg·kg-1的剂量腹腔注射，3d后尾静脉采血测定血糖，以血糖大于16.8mmol·L-1确定为糖尿病模型，其中有24只大鼠成为糖尿

4、病模型。糖尿病模型随机分为3组，每组8只：糖尿病对照（DMC）组；褪黑素治疗（DM+M）组，予褪黑素2mg·kg-1腹腔注射；维生素E治疗(DM+E)组，予维生素E100mg·kg-1腹腔注射。维生素E和褪黑素溶于含10%乙醇的生理盐水，正常对照组和糖尿病对照组大鼠予等体积（2ml·kg-1）含10%乙醇的生理盐水腹腔注射。每日17:00给药，持续给药14d后处死。在实验过程中，DMC和DM+E组各有1只大鼠死亡。1.2.2标本收集处死前大鼠禁食12h，称取体质量，用1.5%戊巴比妥钠45mg·kg-1腹腔注射麻醉后，剖开胸腹腔，心脏穿刺采血，分离血清，

5、测定血糖、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）。迅速取出双肾，去包膜后称质量，取肾皮质0.4g在生理盐水冰浴下制成10%的组织匀浆，-70℃冻存待测MDA、NO含量和SOD、GSHPx活性。1.2.3观测指标及检测方法体质量：每周1次；饮水量：实验第7、8天，连续2d记录每只大鼠的饮水量，取其平均值作为最终数据；肾脏湿质量：去包膜后用精密天平称质量；血清血糖：葡萄糖氧化酶法；TG、TC、BUN和Cr：美国BECKMAN公司全自动生化分析仪检测，TG和TC用酶法，BUN用电极法，Cr用苦味酸法；MDA、NO含量和SOD、GS

6、HPx活性：采用比色法，操作严格按试剂盒说明书进行；匀浆组织蛋白浓度：采用考马斯亮蓝法。1.3统计学处理数据以x-±s表示，应用统计软件SPSS12.0行方差分析，组间比较采用q检验，P0.05为差异有统计学意义。2结果2.1褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠一般情况及糖、脂代谢的影响实验中DMC、DM+M和DM+E组的动物死亡率分别为12.5%、0和12.5%。与NC组大鼠相比，DM组大鼠出现显著的多饮和体质量减轻的症状(P0.01)；与DMC组大鼠比较，DM+M和DM+E组大鼠体质量下降有所改善，饮水量略有降低，以DM+M组为甚，但差异无统计学意义；

7、DM组大鼠血糖较NC组明显升高（P0.01），DM+M、DM+E和DMC组组间血糖相比差异无统计学意义；DMC组大鼠血清TC和TG组水平均明显上升，与NC组相比差异有统计学意义（P0.01）。与DMC组相比，DM+M和DM+E组TC和TG明显下降(均P0.05)，DM+M组与DM+E组相比差异无统计学意义。见表1。2.2褪黑素和维生素E对早期糖尿病大鼠肾功能的影响与NC组大鼠相比，DMC组大鼠肾质量、肾质量/体质量明显增加（P0.05,P0.01），血清BUN和Cr显著升高(P0.05,P0.01)；DM+M组上述肾功能指标均有不同程度下降，与DMC组相

8、比，肾质量、肾质量/体质量和BUN有显著性下降(分别为P0.05、P0.01及P