锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX2表达的影响.doc

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1、锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX2表达的影响【摘要】目的：研究锌和维生素E对糖尿病大鼠心肌COX2表达的影响,以此探讨锌和维生素E对糖尿病心肌细胞保护作用的机制。方法：按体重将大鼠随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6

2、mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性(+++～++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为:糖尿病对照组、糖尿病补锌组、糖尿病补VE组和糖尿病补Zn和VE组。6周后将各组大鼠处死,切取心室肌组织,进行免疫组织化学的实验,观察各组心肌组织中COX2的表达水平,利用HPIAS2000图像分析系统测定COX2在以上各组中表达的平均光密度和平均阳性面积率。结果：正常对照组心肌细胞内COX2呈阴性表达,糖尿病对照组心肌细胞内COX2呈阳性表达；糖尿病补锌组和糖尿病补VE组心肌细胞内COX

3、2呈弱阳性表达；糖尿病补Zn+VE组心肌细胞内COX2呈阴性表达。图像分析结果显示，糖尿病补Zn+VE组与糖尿病对照组、糖尿病补锌组及糖尿病补VE组之间COX2的平均光密度及阳性面积率的差异有显著性意义(P<0.05)；糖尿病补Zn+VE组与正常组之间COX2的平均光密度及阳性面积率的差异无显著性意义(P>005)。结论：Zn和VE联合使用可降低糖尿病大鼠心肌组织中COX2的活性,对糖尿病大鼠心肌细胞起了重要的保护作用。【关键词】锌维生素E糖尿病心肌糖尿病(diabetesmellitus,DM)是一类由于胰岛素绝

4、对或相对缺乏或胰岛素生物活性降低,或者以上两者共同引起之体内代谢失调及高血糖状态［1］。临床上主要分为2型,即1型糖尿病和2型糖尿病,世界各国糖尿病患病率均上升,其中90%为2型糖尿病。　　糖尿病性心肌病是糖尿病的慢性并发症之一,是糖尿病发病过程中特异性的心肌受损和心脏功能改变,糖尿病性心肌病的出现可以不伴有缺血性病变、血管病变及高血压等并发症。目前糖尿病性心肌病的确切病因还不清楚,但目前认为糖尿病性心肌病的发生主要与心肌能量代谢紊乱、Ca2+超载、血管动脉硬化、氧化应激、高血压及高血糖导致的心肌细胞凋亡等有关。糖尿病时,高血糖引起的

5、氧化应激参与了心肌细胞的损伤。糖尿病在病理组织形态上主要是由于胰岛损伤,胰岛素绝对或相对缺乏所引起［2］。近年来,国内外许多学者经过临床和流行病学调查,以及周密设计的基础研究和实验研究,虽然对糖尿病的病因有了较多的认识,但对原发性糖尿病的病因仍然不清楚。因此对糖尿病的治疗也就成了目前人们所关注的焦点。6　　环氧化酶又称为前列腺素内过氧化合成酶,前列腺素H合成酶,是催化花生四烯酸转变为前列腺素的限速酶。COX2属于诱导型,静息时不表达,但可以在细胞因子、激素、致癌物质等多种诱导因子的刺激下快速表达,参与多种病理生理过程［3］。近年来研

6、究表明,COX2不仅与病理生理过程有关,与肿瘤的发生发展也有密切的联系。COX2的高表达与糖尿病并发症的发生密切相关。　　Zn作为机体必需的微量营养元素,是体内200多种蛋白酶的金属配基,其水平的提高势必有利于这些酶活性的提高［4］。Zn对细胞保护作用的途径之一,是基于控制过氧化作用［5］。VE作为天然抗氧化成分,对维持体内自由基平衡,促进机体正常发育,保护细胞膜稳定具有重要作用。锌和维生素E是抗氧化剂并具有细胞保护作用。本研究应用免疫组织化学方法观察了锌和维生素E联合应用对高血糖引起的心肌细胞内COX2的表达,旨在探讨两者对糖

7、尿病大鼠氧化应激时心肌结构的影响及对心肌细胞的保护作用。　　1材料与方法　　1.1材料实验动物为昆明种SD大鼠50只,雄性,体重180～200g,由武汉大学医学院实验动物中心提供,适应饲养1w后进行实验。　　1.2方法　　1.2.1动物模型建立及分组按体重随机分为正常对照组(10只)和实验组(40只),各组大鼠禁食12h后,实验组大鼠以60mg/kg的剂量一次性腹腔注射STZ溶液(用0.1mol/L、pH=4.4的构橼酸盐缓冲液在冰浴下配制成11mg/ml的STZ溶液),正常对照组大鼠(NC)注射等体积的枸橼酸盐缓冲液。观察动物饮水、

8、进食及尿量变化等情况。一周后,采尾血测血糖,以血糖浓度>16.6mmol/L,饮水量>40ml/d,尿糖强阳性(+++～++++)的大鼠作为糖尿病大鼠。将选取糖尿病大鼠40只按血糖值参考体重分为糖尿病对照组、