中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜l型钙通道的影响

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1、中药甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响：曹明，葛郁芝，罗骏，王云霞，张淑华，吴志婷【摘要】　　目的研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道的影响，探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常的作用机制。方法用急性酶解法分离大鼠心室肌细胞，采用全细胞膜片钳记录技术，观察不同浓度的甘松挥发油对L型钙通道的影响。结果浓度为3，5，10，20，50μg/g甘松挥发油可浓度依赖性地抑制L型钙电流，在浓度为10μg/g时，给药后电流密度抑制约为（45.7±3.5）%(n=5,P<0.01),可使心肌细

2、胞L型钙电流-电压曲线上移，但激活电位、峰电位及反转电位无改变；使激活曲线向正电位方向变化，V1/2从(-5.47±0.50)mV右移至(-2.77±0.49)mV(n=5，P<0.05)；使失活曲线向负电位方向变化,V1/2从(-20.82±0.48)mV左移至(-29.44±1.03)mV(n=5，P<0.05)。结论甘松挥发油可通过浓度依赖性地抑制大鼠心肌细胞膜L型钙通道电流，使I-V曲线上移；使激活曲线右移，使失活曲线左移。【关键词】甘松；膜片钳；L型钙通道；心室肌细胞　　　Abs

3、tract：ObjectiveToobservetheeffectsofthevolatileoilofNardostachyschinensisonL-TypeCalciumchannelinisolatedventricularmyocytesofrats.MethodsSingleventricularmyocytesofrataticdissociationmethod．Theprecordingtechniquechannelcurrentbydiferentdosageofthevolat

4、ileoilofNardostachyschinensisfrom3to50ppm.ResultsThevolatileoilofNardostachyschinensisdecreasedL-typecalciumchannelcurrentinadose—dependentmanner.ThevolatileoilofNardostachyschinensis(10μg/g)decreasedthecurrentdensityby45.7％(n=5,P<0.01),thecurrent—vo

5、ltagecurveovedupandactivepotential，peakpotentialandreversepotentialhadnochange．Theactivationcurveovedtomorepositivepotentialandtheinactivationcurvemovedtomorenegativepotential．ConclusionThevolatileoilofNardostachyschinensisdecreasestheL-TypeCalciumchann

6、elcurrentinadose—dependentmanner,thecurrent-voltagecurveptechniques；L-TypeCalciumchannel；Myocardialcell　　甘松为败酱科甘松属植物，甘松挥发油是甘松有效浓缩成分［1］，主要分布在四川、甘肃、青海等地。其抗心律失常机制已有初步的研究［2］，我们发现甘松挥发油对快钠通道（INa）以及瞬时外向钾通道(Ito)均有浓度依赖性抑制作用，本研究应用膜片钳全细胞记录技术，观察甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道(

7、ICa-L)的影响，从离子通道水平探讨其作用机制。　　1材料和方法　　1.1材料健康成年雌雄性SD大鼠，体质量200～300g，由南昌大学医学院动物所提供。甘松挥发油由阴干后的甘松样品1000g，按《中国药典》（Ⅰ部）甲法进行水蒸馏，经6h后停止加热，静置过夜，油水相分离后得浅绿色油状液体［3］,再将已提取好的甘松挥发油按1∶3的比例用二甲基亚砜溶解，再与ICa-L细胞外液相溶。　　1.2膜片钳记录仪器与设备膜片钳放大器(Axopatch200B)及DigiData1200B型数/模（或模/数）转换器

8、均为美国Axon公司产品，荧光倒置显微镜，03-D玻璃微电极拉制仪。　　　1.3溶液配制无钙台氏液为(mmol/L)：NaC1136，KC15.4，MgCl21．0，NaH2PO40．33，HEPES10，glucose10，NaOH调pH至7．4。KB液为(mmol／L)：KC140，KH2PO420，MgSO43.0，KOH80，谷氨酸50，牛磺酸20，HEPES10，glucose10，EGTA0．5，KOH调pH至7．4。ICa-L细胞外液为正常