柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞L型钙通道mRNA表达的影响

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1、华中科技大学硕士学位论文柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞L-型钙通道mRNA表达的影响姓名：黄淑君申请学位级别：硕士专业：心血管内科指导教师：廖玉华2003.5.1o_匕中科技人学H济医学院坝I：学位论文英支缩略语简表VHO：viralhemdisease病毒性心脏病VMC：viralrnyocarditis病毒性心肌炎DCM：dilatedcardiomyopathy扩张型心肌病CaCh：calciumchanneI钙离子通道CPE：cytopathiceffect细胞病变效应c．-L：L-typecalciumcurrentsL一型钙电流CVB3：coxsackievirusB3柯萨

2、奇病毒B3RT—PCR：reversetranscripition—polymerasechainreaction逆转录一聚合酶链反应兰主型丝尘兰型鲨堕堂堕一———塑』!些坚二、摘要中文摘要柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞L一型钙通道mRNA表达的影响硕士研究生：黄淑君指导教师：廖玉华教授目的：构建柯萨奇病毒B3感染的心肌炎细胞模型，研究柯萨奇病毒B3感染对培养大鼠心室肌细胞的L一型钙通道mRNA表达的影响，观察病毒感染心肌细胞的钙电流变化，探讨柯萨奇病毒B3感染对心室肌细胞钙电流和钙通道基因表达的影响，揭示病毒性心肌炎室性心律失常发生的细胞电生理和分子机制。

3、7方法：培养原代新生大鼠心

4、室肌细胞，接种柯萨奇病毒B3，合成大鼠心f、熏肌细胞L-型钙通道各亚单位引物，通过逆转录一聚合酶链反应技术，以B—actJn为内参照，测量钙通道各亚单位mRNA表达量病毒感染前后的变化；应用全细胞膜片钳技术记录柯萨奇病毒B3感染心室肌细胞前后L一型钙电流变化。2牛中科技人学H济医学院坝I一学位论义结果：病毒感染组心室肌细胞L一型钙通道Cl1(4．00±0．07VS2，21±0．4l，p<0．01)，B(2．06±0．06VS1．22±0．30，p<0．05)亚单位mRNA表达量较正常对照组显著增加，而a2／6(4．12±0．】9VS4．13±0．27，P>0．05)亚单位mRNA表达量改变无统

5、计学意义；病毒感染组平均钙电流密度(8．66+0．31pA／pFVS6．97±O．05pA／pF，p<0．01)较正常对照组增大。Y结论：柯萨奇病毒B3感染心室肌细胞后，心室肌细胞钙通道mRNA表达量增多，可能是引起L一型钙电流增大的分子基础，柯萨奇病毒B3介导心室肌细胞L一型钙电流增大和钙通道mRNA表达量增多是引发室性心律失常的重要细胞电生理机制之一。【关键词】柯萨奇病毒B3；心室肌细胞；L-型钙通道；基因表达、，、．r、，’华中科技人学矧济医学院顶fj学位论文AbstractEffectsofcoxsackievirusB3oncalciumchanneIsubunitsmRNAinra

6、tculturedventricularmyocytesMasterCandidateHuangShujunTutorProfessorLiaoYlllluaobjective：WeshallestablishacellularmodelofviralmyocarditisinducedbyCoxsackievirusB3(CVB3)，investigatetheeffectsofcoxsackievirusB3oncalciumchannelsubunitsmRNAinratculturedventricularmyocytesandobservetheelectrophysiologica

7、lchangesofL·typecalciumchamaels．TheaimofthestudyistOexplorethee舵ctsofcoxsackievirusB3onL-typecalciumcurrentsandthegeneexpressionofcalciumchannelsinratventricularmyocytes，andtOrevealthecellularelectrophysiologicalandmolecularmechanismsofventriculararrhythmiasinviralmyocarditis．Methods：Primaryratcultu

8、redventricularmyocyteswereinoculatedwithcoxsackievirusB3．ThechangesofcalciumchalmelsubunitsmRNAweremeasuredbysemi-·quantitativereversetranscription-—polymerasechainreaction(RT—PeR)andnormalizedto[3-ac