中医肝证情绪测量及与5-羟色胺转运体基因多态性相关的研究

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1、中医肝证情绪测量及与5-羟色胺转运体基因多态性相关的研究20O4年第l9卷第ll期中国医药?669??临床研究?中医肝证情绪测量及与5一羟色胺转运体基因多态性相关的研究*尤劲松胡随瑜张宏耕(广东省中医院神经内科,广州510120;中南大学湘雅医院中西医结合研究所,长沙410008;湖南省脑科医院神经症科,长沙4101307)摘要:目的:探讨4种中医肝病证候情绪特征及与5一羟色胺转运体(5一rrrr)基因多态性的相关性.方法:采用Beck焦虑量表,Beck抑郁量表对203例肝气郁结证,肝火上炎证,肝气虚证,肝阳上亢证患者及90例健康人对照进行情绪测量.运用多聚酶链式反

2、应技术(PCR)检测5一HITr启动子区(5一HmPR)基因多态性在4种中医证型中的分布频率,并与健康人对照组比较.结果:4种中医肝证患者Beck焦虑量表,Beck抑郁量表测值积分均显着高于健康人对照组(P<0.01);Beck焦虑量表测值肝火上炎证显着高于肝气郁结证和肝气虚证(P<0.01);Beck抑郁量表测值肝气郁结证和肝气虚证显着高于肝阳上亢证组(P<0.01.P<0.05).肝火上炎证,肝阳上亢证患者5一HTILPRSS基因型频率显着高于健康人对照组(P<0.05,P<0.05);肝火上炎证患者s等位基因频率亦显着高于健

3、康人对照组(P<0.01).结论:5一HTrIPR多态性SS型个体可能是肝火上炎证和肝阳上亢证的易感人群,且该人群具有明显的焦虑情绪特征.关键词:中医肝病;情绪特征;基因;多态性;5一羟色胺转运体中医肝病证候存在不同程度的情绪障碍,近年来采用心理量表对中医肝证情绪障碍的客观和量化研究表明肝证患者有焦虑和抑郁两种情绪状态.中医证候是一种相对稳定的病理生理状态,形成这种病理生理状态的原因可能与个体基因所决定的遗传易感素质有关.异常情绪状态的产生和变化涉及一系列复杂的神经生物化学改变,而个体基因所决定的遗传特征是其物质基础之一.与中枢神经递质表达和功能相关的一些基因

4、多态性近年来成为探索精神,神经类疾病病因的重点.本研究在采用Beck焦虑,Beck抑郁量表测量肝气郁结证,肝火上炎证,肝气虚证,肝阳上亢证患者与健康对照者情绪状态的同时,检测了5一羟色胺转运体(serotonintransporter.5一HITr)基因多态性在各组中的分布频率,探讨与中医肝病证候相关的分子遗传机理.对象与方法1.研究对象患者组共203例,为2001年3月～2002年3月湖南省脑科医院,中南大学湘雅医院门诊及住院患者,男98例,女105例,年龄18～60岁,平均年龄(39-I-14)岁.健康人对照组共90例,按与患者组性别,年龄大致相当的条件选取,其

5、中男42例,女48例,年龄(38-I-11)岁,来自自愿献血者,中南大学学生及职工,经病史调查,体检,血常规,肝功能,胸透,心电图等检查,排除精神及重大躯体疾病者.研究对象均为湖南汉族人群,对本研究知情并同意.2.中医辨证及分组按中南大学湘雅医院中西医结合研究所研究并经鉴定的标准…,均由副主任医师以上两人同时完成,其中肝气郁结证50例,肝火上炎证50例,肝气虚证50例,肝阳上亢证53例.西医病种包括神经症103例,偏头痛54例和原发性高血压46例,均按疾病各专业委员会诊断标准.3.情绪测量均由患者自评,Beck焦虑量表共21条,按无,轻度(无多大烦扰),中度(感到不

6、适但尚能忍受),重度(只能勉强忍受)分别记1,2,3,4分,累加计算总分后通过Y=int(1.19X)取整计算标准分.Beck抑郁量表共21条,*国家自然科学基金资助项目(3oo70953)通讯作者:尤劲松,广州市大德路111号?670?中国医药2004年第l9卷第ll期按严重程度分别记0,1,2,3分,累加计算总分.4.血标本采集及DNA抽提取肘静脉血5ml,0.2%EDTA—Na2抗凝,用淋巴细胞分离液分离单个核细胞,常规酚,氯仿法抽提基因组DNA.5.PCR条件及产物检测5一羟色胺转运体启动子区多态性(5一mT.1inkedpolymorphicregion,

7、5一mⅥPR)基因s/L型多态性检测,PCR反应液共20,含有5O～100ng基因组DNA,10pmol引物,lA—Taq酶,lO2×GC缓冲液,250tmaol/LdNTPs.PCR条件:94℃5min预变性,继以94℃变性60s,61℃退火30s,72℃延伸60s,共3O个循环,72℃延伸10min.将PCR产物于6%非变性聚丙烯酰胺凝胶中,100V垂直电泳分离4h,以硝酸银染色法检视各区带,与分子量标准物比较各片段的大小.484bp片段为"S"型,528bp片段为"L"型,616bp的为")【L"(超长型,由于本等位基因罕见,全部样本中仅检出4个,统计时并