中风痰瘀阻络证与肝阳暴亢证和agt基因多态性的相关性的研究

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1、湖北中医学院2005级硕l二学位论文中英文对照缩略词表缩略词英文全称中文全称AGTPCRRFLPCIRASAngIAngiotensinogenPolymenseChainReaction血管紧张素原聚合酶链反应RestrictionFragmentLengthPolymorphism限制性片段长度多态性CerebralIschemicStrokeRenin。。Angiotensin‘。SystemAngiotensinIAngIIAngiotensinⅡACETGTCBPACICELIFBGdNTPATPCT

2、PGTPAngiotensinConvertingEnzymeTriglyceridesTotalcholesterolBloodPressure缺血性脑卒中肾素一血管紧张素系统血管紧张素I血管紧张素Ⅱ血管紧张素转化酶甘油三酯总胆固醇血压AtherothromboticCerebralInfarction动脉粥样硬化性血栓性脑梗死CerebralEmbolismLacunarInfarctionFastingBloodGlucosedeoxy—ribonucleosidetriphosphateAdenosin

3、eTriphosphateCytidineTriphosphateGuanosineTriphosphateLDL—CLowdensity1ipoprotein—cholester01脑栓塞腔隙性脑梗死空腹血糖三磷酸脱氧核糖核苷三磷酸腺甙三磷酸胞苷三磷酸鸟苷低密度脂蛋白一胆固醇HDL_CHighdensity1ipoprotein—cholesterol高密度脂蛋白一胆固醇DNARNAmRNADeoxyribonucleicacidRibonucleicAcidMessengerRNA脱氧核糖核酸核糖核酸信使核

4、糖核酸5原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含其他任何个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究作出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：豸，存日期：9p年乡月夕日学位论文使用授权说明本人完全了解湖北中医学院关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：按照学校要求提交学位论文的印刷本；学校有权保存学位论文的印刷本；在不以赢利为目的的前提下，学校可以公布学位论文的

5、部分或全部内容。(保密论文在解密后，遵守此规定)论文作者签名：多．饪导师签名：名磅亿El期：，s年舌月户日湖北中医学院2005级硕J二学位论文中文摘要目的探讨中风两种常见中医证型(风痰瘀血痹阻脉络证及肝阳暴亢风火上扰证)与血管紧张素原(AGT)基因M235T多态性的相关性，通过对AGT基因型及等位基因在两种中医证型上的频率分布进行基础性研究，为中风的中医辩证分型提供分子生物学依据，为中风证候研究提供新的思路。，方法1、研究对象：为2006—2007年于湖北省中医院以及武汉市第一医院神经内科住院病例104例，健康

6、对照组50例。中医诊断参照1996年国家中医药管理局医政司脑病急症协作组制定的《急性缺血性脑卒中患者处理建议》及Ⅸ中风病辨证诊断标准》，符合风痰瘀血痹阻脉络证及肝阳暴亢风火上扰证，西医诊断参照1995年中华全国脑血管病学术会议制定《各类脑血管疾病的诊断要点》，诊断为缺血性脑卒中，无意识障碍；将104例样本随机分为两组，其中A组为风痰瘀血痹阻脉络证，56例；B组为肝阳暴亢风火上扰证，48例；年龄均为40～80岁。并且记录两组一般及临床资料(年龄：血压、空腹血糖、总胆固醇以及甘油三酯)。2、全血样本进行分离提取DN

7、A：抽取104例中风患者及50例健康对照者的肘静脉血2ml置于抗凝管内作为实验样本，然后对样本进行分离提取DNA。3、聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析法(PCR—RFLP)：对分离提取的DNA进行聚合酶链式反应(PCR)扩增，扩增产物经1．5％琼脂糖凝胶电泳，在紫外灯下观察电泳结果。同时扩增产物进行限制性内切酶消化，酶切产物进行1．5％琼脂糖凝胶电泳观察结果并记录。4、数据的统计分析：记录的结果运用基因计数法计算基因频率，A、B两组与对照组基因型和等位基因频率分布比较用X2检验，A、B两组危险因素的统计用

8、z±s，组间均数比较用t检验。结果1、血管紧张素原(AGT)基因经PCR扩增后产物为一条163bp的DNA片段。PCR产物经过Tthlll一I内切酶消化后最终电泳有三种结果分别为AGT基因M等位基因纯合型(235MM型)因无酶切位点，酶切后电泳显示一条163bp的条带，AGT湖北中医学院2005级硕’}：学位论文基因T等位基因纯合型(235TT型)因在外显子2核苷酸704处T变成C，故