冠心病痰瘀证候与载脂蛋白e基因多态性相关性的研究的论文

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1、冠心病痰瘀证候与载脂蛋白E基因多态性相关性的研究的论文冠心病痰瘀证候与载脂蛋白E基因多态性相关性的研究的论文作者：莫鸿辉,潘佩光,黄衍寿,洪永敦,王艳红【摘要】【目的】探讨冠心病(chd)痰瘀证候与载脂蛋白e(apoe)血清水平及其基因多态性的关系。【方法】选择符合中医痰瘀证型的chd患者(chd组)97例,其中又分为痰证组30例、瘀证组32例、痰瘀证组35例。另选择健康人群35例设为正常对照组。检测所有样本的apoe血清水平,提取全血dna,用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(pcrrflp)

2、技术检测apoe基因型,采用spss110软件进行相关性分析。【结果】传统危险因素中糖尿病、吸烟、低密度脂蛋白胆固醇(ldlc)和高密度脂蛋白胆固醇(hdlc)等指标chd组明显高于正常对照组(p005)。chd组及组内各型的apoe血清水平均高于正常对照组(p001)。chd组内各证型间比较,痰瘀证apoe血清水平明显高于痰证和瘀证(p001),瘀证apoe血清水平也高于痰证(p005)。chd组e3/3基因型频率低于正常对照组(p005),而e3/4基因型频率明显高于正常对照组(

3、p001)。chd组e4等位基因频率高于正常对照组(p005)。痰证的e3/4基因型和e4等位基因频率高于痰瘀证、瘀证(p005),而e3/3基因型及e3等位基因在痰证中的频率低于痰瘀证及瘀证(p005)。..cOM【结论】apoe可能是chd独立预测因子之一,其血清水平升高与chd痰瘀证关系密切。apoee4等位基因和chd密切相关,其中e3/4基因型可能是chd及其痰证的主要易感基因之一。【关键词】冠状动脉疾病;载脂蛋白e;基因多态性;痰瘀证冠心病(chd)是威胁人类健康的重要疾病。既往

4、研究识别了多种冠心病危险因素,但仍有约50%的chd患者不能以已知危险因素解释[1],因而进一步深入探讨其病因势在必行。目前,chd病因研究主要集中在两个方面：继续从宏观水平寻找危险因素及从微观水平探讨chd发病的遗传易感机理。随着分子生物学理论和技术的发展,chd基因机制的研究也日益受到重视,chd是一种复杂的多基因遗传病这一观点也日益为人们所接受,这将为从分子水平上治疗chd开辟新的途径。载脂蛋白e(apoe)是一种多功能蛋白,是胆固醇和脂蛋白代谢的关键调节蛋白之一[2],与chd的关系密切,其

5、功能与结构和基因表达密切相关,因此,研究apoe基因多态性与chd的相关性已成为热点[3-4]。本研究通过观测chd患者与健康人之间、chd患者痰瘀各证型之间apoe血清水平及其基因多态性的异同,以期能进一步揭开中国人apoe基因多态性与chd关系,指导chd中医临床诊治。现将结果报道如下。1研究对象与方法11研究对象观察病例均为201X年1月～201X年6月广州中医药大学第一附属医院心内科收治的chd患者(chd组),均符合中医痰瘀证型的辨证标准,共97例,其中男58例,女39例;平均年龄(62

6、97±1261)岁。97例痰瘀证型chd患者又分为痰证组(30例)、瘀证组(32例)、痰瘀证组(35例)。另选择同期医院门诊体检且与chd组年龄、性别相匹配的健康者35例(设为正常对照组),其中男18例,女17例;平均年龄(6651±1264)岁。chd组和正常对照组均为无血缘关系的中国广东地区汉族人,2组性别、年龄等基本资料比较,差异无显著性意义(p005),具有可比性。12诊断标准chd诊断按国际心脏病学会和协会及世界卫生组织临床命名标准化联合专题组制定的《缺血性心脏病命名和诊断标准

7、》[5]。中医诊断参照《中医病证诊断疗效标准》[6]中胸痹心痛的辨证标准。排除标准：感染性疾病及非感染性炎症疾病患者;严重心力衰竭,美国纽约心脏病协会心功能3级或以上患者;严重肝功能不全(谷丙转氨酶达正常上限2倍以上);严重肾功能不全需透析者;肿瘤患者;造血系统疾病患者。13观察指标观察chd组与正常对照组的基线资料,各组apoe血清水平,apoe基因型与等位基因频率在chd不同中医证型中的分布情况。131chd组与对照组基线资料比较两组的性别、年龄、吸烟、饮酒、家族史、合并症、体质量指数(b

8、mi)及血脂水平。132标本收集与模板dna制备研究对象入院后次日凌晨6时进行采血，采集其空腹非抗凝外周静脉血3ml,标本置于-70℃冰箱保存。使用试剂：dna分子标准dl201Xmarker(大连宝生物公司产品),qiaampdnabloodminikit(qiagen公司产品),taqdnapolymerase、dntps(均为北京索奥公司产品)。外周血白细胞dna的提取具体步骤(操作方法按照试剂的说明书进行)：取15ml离心管,注明名字;管底加蛋白酶k(p