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《中国汉族人芳香二烷基磷酸酯酶基因启动子多态性与冠心病的关系》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、中国汉族人芳香二烷基磷酸酯酶基因启动子多态性与冠心病的关系534基础医学与临床BasicMedicalSciencesa—ndC—linics文章编号:1001.6325(2002)06.0534—04中国汉族人芳香二烷基磷酸酯酶基因启动子多态性与冠心病的关系霍麟,周新,郑芳,叶光明,贺小玲,刘芳,李霞(武汉大学中南医院检验科,武汉430071)摘要:观察芳香二烷基磷酸酯酶(paraoxonase,PON1)基因启动子区.108(C/T)多态性与人类冠心病(CHD)及其血脂水平的关系.采用多聚酶链反应.限制性片
2、段长度多态性的分析方法(PCR-RFLP)检测CHD患者PON1基因启动子区.108位点的多态性.结果显示PON1启动子区.108位点存在多态性,出现三种基因型:1Tr,Tc和cc.各等位基因的分布在正常对照组及CHD组之间存在显着性差异,且CC基因型的分布在两组间也有显着差异(P<0.05).正常对照组与CHD组间各基因型血浆ApoAI水平无显着性差异;CHD组cc纯合子的血浆高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平明显低于对照组(P<0.05),而两组间1Tr纯合子和Tc杂合子的HDL-C水平无统计
3、学差异.说明该多态性可能与CHD有一定的相关性.关键词:芳香二烷基磷酸酯酶;启动子;冠心病;动脉粥样硬化;多态性中图分类号:R541.404文献标识码:A大量流行病学与临床研究表明,冠状动脉粥样硬化性心脏病(coronaryatheroscleroticheartdisease)[以下简称冠心病(coronaryheartdisease,CHD)]是多数发达国家和许多发展中国家成人发病和死亡的主要原因.血浆低密度脂蛋白(LDL)氧化是动脉粥样硬化(AS)发生发展的一个重要的早期环节.许多试验证明高密度脂蛋白(H
4、DL)能在体外抑制LDL氧化,在某种程度上这种功能可以解释HDL抗AS的保护效应.研究表明…,存在于HDL中的一些酶可能促进了这个过程,其中包括芳香二烷基磷酸酯酶(paraoxonaseEC3.1.8.1,PON1).PON1是一类能催化水解磷酸酯键的芳香酯酶,又称对氧磷酶,因其能水解神经毒杀虫剂对氧磷(paraoxon)而得名.它是一种HDL结合酶,由于能够抑制杀虫剂和神经毒气中的有机磷酸盐(OPs),发挥保护功能而被人们熟知.PON基因家族至少包括三个成员,PON1,PON2,PON3,(定位在染色体7q2
5、1.3—22.12上.已证实PON2和PON3能在不同的组织表达,但不合成成熟的蛋白质,产物呈胞内作用而非分泌型作用;PON1基因产物即血清芳香二烷基磷酸酯酶,主要在收稿日期:2001—12—28修回日期:2oo2一o9一o4基金项目:湖北省攻关项目(20002P1202)通讯作者肝脏合成,是唯一存在于血浆中的PON蛋白.MacknessMI_3等首先发现,纯化的人HDL结合的PON1能通过防止LDL中脂过氧化物的产生和积聚来阻碍LDL的氧化.因此PON酶活性及其基因多态性与AS关系的研究越来越受到重视.本文对
6、PON1启动子.108位点多态性分布频率与CHD的关系进行了研究.1材料1.1研究对象冠心病患者60例,其中男37例,女23例,年龄39—75岁(平均64.4±1.0岁),诊断标准依据国际心脏病学会和协会及WHO临床命名标准化联合专题组的报告制定的《缺血性心脏病的命名和诊断标准》,经冠脉造影或根据临床指标(心梗史)由武汉大学中南医院确诊.对照组为湖北地区无血缘关系的健康个体150例(男84例,女66例),年龄35—70岁(平均64.4±0.8岁),经询问病史,体检及心电图,胸部X线摄片等检查排除心血管病史,糖尿
7、病及脑血管和肿瘤病史.基础医学与临床BasicMedicalSciencesandClinics5351.2试剂和仪器PE2400型DNA扩增仪购自美国PE公司,Taq酶购自美国Promega公司,限制性内切酶BstUI购自NEB公司,pBR322/MspIDNAMarker由华美生物工程公司提供,引物由上海生工生物工程公司合成.2方法2.1多态性分析用改良的碘化钠法从外周血白细胞中(ED.TA.I(2抗凝)提取DNA作为模板,上游引物为5'.GACCGCAAGCCACGCCTTCTGTGCACG-3',下游弓
8、I物为5'.TATArrItr^ATTGCAGCCGCAGCCCrIIGCrIIGGGGC-AGCGCCCATrGGCCCGCCGC.3',进行PCR扩增.弓I物通过碱基错配(下划线处为错配碱基)产生一个内切酶位点(CG'CG),并且在下游引物的5'端加上一串TA尾,以调整GC含量.用BstUI酶切消化后,进行12%聚丙烯酰胺凝胶电泳,银染后分析.2.2血脂分析空腹12h以上采静脉血分
