抗人cd33单克隆抗体(him34、wm53、m195)抗原识别表位的论文

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1、抗人CD33单克隆抗体(HIM34、WM53、M195)抗原识别表位的论文【摘要】目的：确定抗人cd33单克隆抗体(him34、53、m195)抗原识别表位所在区域，进而阐明抗体识别表位不同于其介导的生物学作用之间的关系。方法：将四个cd33胞外区不同长度的基因片段定向克隆入真核表达载体pdisplay，构建成真核表达载体pdisplay/ep1、2、3、4，分别将空载体和构建的质粒通过磷酸钙沉淀法转染入293t细胞，瞬时转染48小时后利用流式细胞仪通过抗血凝素a（ha）抗体标记以检测各质粒在细胞表面的表达,同时检测him34、53、

2、m195和不同区段的结合活性。结果：抗人cd33单克隆抗体him34能识别pdisplay/ep1、2、3表达的蛋白，53能识别pdisplay/ep1表达的蛋白，m195则均能识别四个片段所表达的蛋白。结论：him34、53、m195识别的cd33抗原表位分别位于115～170、17～60、170～262氨基酸。　【关键词】cd33单克隆抗体抗原表位白血病　　preliminarystudyofantigenicepitopesrecognizedbymab(him34,53,m195)againsthumancd33　　zuoyu

3、feng,in,tianzheng,chenling,quhao,atology,chineseacademyofmedicalsciencespekingunionmedicalcollege,tianjin300020,china　　［abstract］objective:toidentifytheregionsofantigenicepitopesrecognizedbymonoclonalantibodies(mab)(him34,53,m195)againsthumancd33.methods:fourdifferentlen

4、gthgenefragmentsofhumancd33extracellularregioneintothemammalianexpressionvectorpdisplay.thentheseconstructedandcontrolplasmidsphosphatednacoprecipitation.fortyeighthoursaftertransfection,theefficiencyoftransfectionagglutinina）mab.theregionsofcd33antigenrecognizedbyantic

5、d33antibodies(him34,53,m195)abhim34.theproteinsexpressedbypdisplay/ep1ab53.theproteinsexpressedbypdisplay/ep1,2,3and4abm195.conclusion:theantigenicepitopesrecognizedbyhim34arelocatedintheaminoacidresidue(aar)115170ofcd33antigen.theantigenicepitopesrecognizedby53areloca

6、tedintheaar1760ofcd33antigen.theantigenicepitopesrecognizedbym195arelocatedintheaar170262ofcd33antigen.　　［keyonoclonalantibody；antigenicepitope；leukemia　　him34、53、m195是不同克隆的抗cd33单克隆抗体。.目前基础和临床研究较多的是人源化m195(hum195)，在hum195上连接肿瘤抗生素制备成gemtuzumabozogamicin（go）或连接放射性同位素用于急性髓

7、系白血病（aml）的治疗。2000年5月美国食品药品监督管理局（fda）批准了go上市，该药适用于年龄>60岁的首次复发及那些不能耐受化疗毒性的cd33+aml患者，标志抗cd33抗体治疗aml进入了一个新阶段［1］。未标记的hum195特异地结合cd33后，除通过巨噬细胞的吞噬作用、激活补体及抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（adcc）来杀伤肿瘤细胞，最新的研究还提示抗cd33单克隆抗体还可以直接诱导白血病细胞发生凋亡［2］。53是美国bd公司的一株抗cd33单克隆抗体。him34是中国医学科学院血液学研究所免疫室制备的一株鼠源性抗c

8、d33单克隆抗体igg1，并经过国际人类白细胞分化抗原协作组会议正式命名（国际编号为ⅴma112、ⅵma47）。前期的实验证明him34诱导白血病细胞发生凋亡的作用不明显。三株