以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究

以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究

ID:10654557

大小:49.50 KB

页数:2页

时间:2018-07-07

以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究_第1页
以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究_第2页
资源描述:

《以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库

1、以竹粉为基质固态培养虫拟蜡菌及其产漆酶条件研究摘要:该研究探讨了不同培养条件对CeriporiopsissubvermisporaNL-4固态发酵产漆酶的影响。结果表明,当培养温度为30℃、培养基的初始含水率为64%、接种量为12%、起始pH6.0时,该菌株活力最好且漆酶产量高;在条件下培养10d,漆酶活力可达12.45U/g干基,比优化前提高了40%。中国1/vie  关键词:虫拟蜡菌;固态发酵;漆酶  中图分类号TQ925文献标识码A1007-7731(2017)08-0018-03  Abstract:Effectofculturecondi

2、tionsfortheproductionoflaccasebyCeriporiopsissubvermisporaNL-4entationusingthemilledbambooasmainsubstrate.Theresultsofsingle-factortestshoalcultureconditionsofthetemperature,moistureofmedium,inoulumvolumeandtheinitialpHisporaNL-4eters,thelaccaseactivityedium,itiveconditions.  

3、Keyispor;Solid-fermentation;Laccase  漆酶(laccase,p-diphenoloxidase,E.C.1.10.3.2)最初是�钠崾髦谢竦玫模�随着生物技术的发展,微生物源漆酶有了较大的发展。由于漆酶在多个领域具有广泛的用途,对漆酶的需求日益增多[1-2]。但目前微生物产漆酶的产量仍不高[3],培养期过长导致染菌的可能性增大;漆酶的产量过低严重制约了其分离提取和纯化[4]。采用农林生物质资源作为主要基质,通过固态培养的方式探索漆酶的产生及其产量的提高,不但可以有效节约资源,降低生产成本,减少污染物的排放[5];

4、同时,与液体发酵相比,固态发酵更接近于自然界的生态环境,有利于菌株产酶[6-7]。虫拟蜡菌(Ceriporiopsissubvermispor)[8]是一类高产漆酶的白腐菌,本研究室对其进行了菌株的诱变,获得了一株漆酶产量明显提高的菌株C.subvermisporaNL-4[9]。因此,本研究以CeriporiopsissubvermisporaNL-4为发酵菌株,以竹粉为主要基质,对该菌固态发酵产漆酶的条件进行优化,以提高漆酶产量和产酶效率[10]。  1材料与方法  1.1菌株C.subvermisporaNL-4,本研究室诱变选育获得。  1

5、.2竹粉竹粉,为毛竹(Phyllostachyspubescens)的加工剩余物,产自浙江临安,烘干后过40目筛,干燥贮存备用。  1.3试剂葡萄糖等均为国产分析纯,购自杭州木木生物科技有限公司;ABTS,购于sigma公司;马铃薯等购于临安浙皖农贸城。  1.4培养基(1)PDA固体培养基(in[10]。(2)液体种子培养基(in[10]。(3)固态发酵基础培养基:在250mL三角瓶中装竹粉30g,含水率60%,121℃灭菌20min[10]。  1.5固态发酵参照王超等固态培养方法[10]。  1.6生化参数的测定(1)粗酶液制备及酶活测定:参

6、照高恩丽等方法并改进[11]。参照黄丹莲等方法并改进[12]。(2)生物量的测定:用氨基葡糖法,参照彭丹方法测定[13]。  2结果与分析  2.1C.subvermisporaNL-4生长曲线和产酶曲线将液体种子以10%接种量接入固体发酵基础培养基中,180r/min、28℃培养16d,漆酶产量和生物量如图1。由图1中菌体的生长曲线显示,在前4d之内,菌体生长较慢,之后在4~8d之内菌体干重增加较快,呈现出对数生长期,8~11d后保持基本稳定[10]。酶活曲线显示,C.subvermisporaNL-4在固态发酵条件下,第5d才开始产酶,第12d

7、漆酶活力达到最高,因此初步确定12d为后续发酵条件研究的培养时间。  2.2培养温度对C.subvermisporaNL-4固态发酵产漆酶的影响将固态发酵基础培养基分别在15℃、20℃、25℃、30℃、35℃、40℃条件下,180r/min、恒温培养12d后测漆酶产量,结果如图2。图2表明,培养温度对C.subvermisporaNL-4固态发酵产漆酶的影响较大,30℃时漆酶酶活达到最高,40℃时仅为最高酶活的39%,因此确定30℃为固态发酵产漆酶的最适培养温度[10]。  2.3起始含水率对C.subvermisporaNL-4固态发酵产漆酶的影

8、响将固态发酵基础培养基的含水率分别调为44%、48%、52%、56%、60%、64%、68%和72%,180r/min、3

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文

此文档下载收益归作者所有

当前文档最多预览五页,下载文档查看全文
温馨提示:
1. 部分包含数学公式或PPT动画的文件,查看预览时可能会显示错乱或异常,文件下载后无此问题,请放心下载。
2. 本文档由用户上传,版权归属用户,天天文库负责整理代发布。如果您对本文档版权有争议请及时联系客服。
3. 下载前请仔细阅读文档内容,确认文档内容符合您的需求后进行下载,若出现内容与标题不符可向本站投诉处理。
4. 下载文档时可能由于网络波动等原因无法下载或下载错误,付费完成后未能成功下载的用户请联系客服处理。