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1、健脾止动汤对多发性抽动症模型鼠纹状体多巴胺通路的影响论文.freelinepathodelmicestriatum,andprovideneuralbiochemicalproofforJianpizhidongdecoctionintreatingchildrenTourettesyndrome(TS).Methods90maleICRmicelydividedinto6groups,namelyblankcontrolgroup,modelgroup,Tiapridegroup,Jianpizhidongdecoctiongroup,Liujunzigroup,Xieqingg
2、roup.Exceptblankcontrolgroup,other5groupsmiceadetoTSmodelsbyintraperitonealinjectionof3,3’-Iminodipropionitrile(IDPN).A3K15台式低温高速冷冻离心机,过滤膜(孔径0.22μm),玻璃匀浆器。2实验方法2.1分组及造模ICR雄性小鼠90只,随机分成6组,分别为空白组、模型组、泰必利组、健脾止动汤组、六君子汤组、泻青汤组,每组15只。分笼适应性喂养1周后开始造模。参照神经毒素全身用药法1,除空白组外,其余5组小鼠在灌胃给药后立即进行腹腔注射IDPN,为获得更明显的TS
3、模型鼠的特征性行为改变(运动行为和刻板行为1),剂量由原文献报道的150mg/(kg·d)增至300mg/(kg·d),空白组腹腔注射等体积的生理盐水,每日1次,连续7d。造模7d后模型鼠均出现不同程度的运动行为(探究活动4-5增加)和刻板行为(头部抽动、旋转)1,且该行为表现不需特殊处理可一直持续2个月。2.2给药造模当天同时进行灌胃给药,以相当于儿童临床用药的5倍剂量20mL/(kg·d),空白组和模型组给予生理盐水,其余4组分别给予泰必利(按25mg/kg配成混悬液)、健脾止动汤(太子参、炒白术、茯苓、羌活、防风、龙胆草等,1mL含1g原药材)、六君子汤(太子参、炒白术、茯苓
4、、法半夏、陈皮,1mL含0.35g原药材)、泻青汤(羌活、防风、栀子、龙胆草、川芎、当归、酒大黄,1mL含0.45g原药材),每日1次,连续4周。2.3指标测定2.3.1色谱条件参照文献4方法,美国ESA5600A高效液相色谱8通道库仑阵列电化学分析系统,色谱柱：ESAHR-80(4.6mm×8cm),流动相：71mmol/L一水柠檬酸、75.8mmol/L柠檬酸三钠、0.13mmol/L乙二胺四乙酸二钠、0.42mmol/L1-庚烷磺酸钠、6%甲醇,0.22μm滤膜过滤,超声脱气10min。柱温30℃,流速0.6mL/min,电势设置-50、100、300、500mV,进样量20
5、μL。2.3.2纹状体单胺类递质检测灌胃4周,末次给药24h后,断头取脑,冰盒上快速剥离小鼠脑纹状体,电子天平称重,铝箔包好,按组分装入纱布袋,置液氮罐待测。将脑纹状体放到玻璃匀浆器中,每50mg纹状体加入预冷的500μL脑组织递质工作液4(EDTA-Na2200mg,偏重亚硫酸钠200mg,含0.1mg/mLDHBA的内标液100μL,加0.2mol/L高氯酸溶液定容至500mL),冰上快速匀浆,吸取匀浆液,4℃、14000g离心15min,取上清进样检测DA、5-HT、NE、DOPAC、HVA、5-HIAA含量。3统计学方法定量资料用x±s表示,采用SPSS15.0软件包,对正
6、态分布数据,采用单因素方差分析,方差齐,采用LSD检验(P＜0.05),方差不齐,采用Games-Ho.北京：人民卫生出版社,2002.44－46,48,237－238,103.2刘智胜,静进.儿童心理行为障碍M.北京：人民卫生出版社,2007.7.3王素梅,吴力群,崔霞,等.平肝健脾化痰法治疗儿童多发性抽动症285例J.辽宁中医杂志,2006,33(11)：1431.4张向晖,刘军,苏林雁.库仑阵列电化学高效液相色谱法测定大鼠脑组织中单胺类神经递质及代谢产物J.医学临床研究,2007,24(1)：1－3.5张黎.仔鼠发育早期缺铁的行为改变与多巴胺D5受体D.浙江大学2007年硕士
7、论文.27－28.6左启华.小儿神经系统疾病M.第2版.北京：人民卫生出版社,2005.937.7韩济生.神经科学原理(上册)M.第2版.北京：北京医科大学出版社,1999.481－482,486,495,504－505,511－512,515,518.8刘道宽,蒋鱼平,江澄川,等.锥体外系疾病M.上海：上海科学技术出版社,2000.9－11,13.9张如意,李林,艾厚喜,等.多巴胺能系统亢进法建立拟抽动秽语综合征小鼠模型J.中国行为医学科学,2005,14(3)：2
