解偶联蛋白2启动子区的论文

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1、解偶联蛋白2启动子区的论文作者：李建宁，何岚，叶枫，董春萍，王毅【摘要】目的：研究解偶联蛋白2（ucp2）基因启动子区-866g/a的多态性在中国北方汉族正常人群及糖尿病人群的分布，了解其与2型糖尿病（t2dm）及β细胞功能关系.方法：采用pcr及pcrrflp方法检测101名正常人及192名t2dm患者的ucp2基因启动子区-866g/a的多态性，对t2dm患者进行葡萄糖耐量试验，计算β细胞功能指数及胰岛素敏感指数.结果：①-866g/a基因型频率在中国北方汉族正常人群及t2dm人群中的分布分别为：gg31例(30.7%),ga46例(45.5

2、%),aa24例(23.8%)及gg44例(28.1%),ga103例(49.6%),aa45例(22.3%)，统计分析无显著性差异.②-866g/a多态性的含a等位基因型与胰腺β细胞的胰岛素分泌功能指数δi30/δg30，homaβ，mbci及ins30呈负相关.与胰岛素敏感指数iai无关.结论：①中国北方汉族人群的ucp2基因启动子区-866g/a基因型分布与日本人相似，与欧洲白人及高加索人群存在显著性差异.②ucp2基因启动子区-866g/a基因型在两组人群的分布无差异.③ucp2基因启动子区-866g/a多态性与胰腺β细胞的胰岛素分泌功能相

3、密切相关.【关键词】解偶联蛋白2；2型糖尿病；基因多态性0引言β细胞功能减低和胰岛素抵抗是2型糖尿病（t2dm）发病的主要因子，其发生不仅受复杂的环境因素影响，而且受遗传因素影响，被认为是一类多基因遗传性疾病.近年的研究显示解偶联蛋白2（ucp2）参与了能量代谢atp的解偶联，其启动子区-866g/a多态性影响了胰腺β细胞功能，为糖尿病发生危险性的预测因子.我们对中国北方汉族人群中ucp2基因启动子区-866g/a多态性与t2dm及胰腺β细胞分泌功能的相关性进行研究.1对象和方法1.1对象糖尿病组（dm）：192名t2dm患者来自200503/2

4、00512西安交通大学第一附属医院内分泌科门诊及病房，诊断标准参考1999年世界卫生组织（mol/l和/或75g葡萄糖耐量试验（ogtt试验）服糖后2h血浆葡萄糖水平（pg2h）≥11.1mmol/l.所有患者年龄≥35岁，有严重心、脑、肝、肾功能损害及影响糖代谢的其他内分泌疾病者被排除在外.非糖尿病组（ndm）：101名非糖尿病患者来自西安交通大学第一附属医院体检中心，年龄≥35岁，fpg<6.1mmol/l并且pg2h<7.8mmol/l，除外严重心、脑、肝、肾功能损害及糖尿病家族史者.1.2方法1.2.1一般观察指标记录两组患者

5、的姓名、性别、年龄、发病年龄、病程、收缩压（sp）,舒张压（dp），并测定空腹总胆固醇（chol）,三酰甘油（tg）,高密度脂蛋白（hdl）及低密度脂蛋白（ldl）,并计算体质量指数（bmi）.1.2.2ogtt试验t2dm患者于夜间禁食8～10h，于第2日清晨空腹服用75g葡萄糖，分别于0，30，60，120，180min取静脉血，测定空腹血糖(fpg),30min血糖（pg30）,60min血糖(pg1h),120min血糖（pg2h）,180min血糖（pg3h）及空腹胰岛素(fins),30min胰岛素（ins30）,60min胰岛素（in

6、s1h）,120min胰岛素（ins2h）,180min胰岛素（ins3h）.1.2.3胰岛素敏感性及分泌功能指标［1-3］胰岛素分泌指数(homaβ)=20×fins/(fpg3.5)，胰岛素分泌指数(δins30/δpg30)=(ins30fins)/(pg30fpg)，新β细胞功能指数（mbci）=(fpg×fins)/(pg2h+pg1h7.0)，空腹血糖胰岛素乘积的倒数（iai=1/(fpg×fins).1.2.4ucp2基因启动子区-866g/a多态性的pcrrlfp分析采用离心柱型血液基因组dna提取试剂盒（北京天为时代科

7、技有限公司）提取人基因组.上游引物：5′cacgctgcttctgccaggac3′，下游引物：5′aggcgtcaggagatggaccg3′（北京奥科生物技术有限责任公司），pcr反应条件［4］：首先在95℃变性8min，然后95℃变性1min，65℃退火1min，72℃延伸1min，共35个循环，最后72℃延伸7min.使用2×taqpluspcrmastermix（北京天为时代科技有限公司）进行pcr.取pcr产物10μl加入10u的mlu1限制性内切酶37℃水浴过夜，消化片段用25g/l琼脂糖电泳分离，eb显色，在紫外灯下观察并记

8、录结果.g等位基因者被mlu1切为两段（291bp和70bp）,而a等位基因则不被切开（361bp，图1）.统计学处理：以