γ射线辐照对β淀粉样肽诱导红细胞膜损害的作用的论文

《γ射线辐照对β淀粉样肽诱导红细胞膜损害的作用的论文》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。

1、γ射线辐照对β淀粉样肽诱导红细胞膜损害的作用的论文作者：曹媛,张献清，齐浩,曾成鸣【摘要】目的：研究γ射线辐照对β淀粉样肽(aβ)诱导的红细胞膜损害的保护作用.方法：红细胞经50gy和100gyγ射线照射后，再用aβ处理，分别用分光光度法测定红细胞溶血率和渗透脆性；扫描电镜观察细胞形态；1,6二苯基1,3,5己三烯（dph）荧光探针标记检测细胞膜流动性.结果：γ射线辐照可抑制红细胞的自然溶血和aβ导致的溶血，但只有100gy辐照的差异具有统计学意义（p<0.05），使自然溶血率和aβ引起的溶血率由（3.76±0.50）%，（11.9

2、0±1.50）%分别降至（1.87±0.09）%和（7.90±0.90）%.50gy和100gy的辐照均可降低aβ引起的细胞变形程度，增加细胞膜的流动性（p<0.05），荧光探针的各相异性值由0.36±0.01分别降至0.33±0.00和0.32±0.01，并提高红细胞对低渗溶液的耐受性，50%溶血时的nacl浓度由82.3mmol/l分别降至80.7mmol/l和76.9mmol/l.结论：在本实验条件下，γ射线辐照可降低aβ对红细胞膜的损伤，并可增加红细胞膜的流动性及稳定性.【关键词】γ射线；淀粉样β蛋白；红细胞；溶血；膜流动性　　0引言

3、　　低剂量γ射线辐照（<1gy）可刺激机体的免疫功能，提高机体的抗病能力［1］.目前，临床上常用15~35gy的γ射线对血液进行辐照，灭活血液中的淋巴细胞，以预防输血相关的免疫疾病［2］.该剂量范围的γ辐射对血液中的其他成分也可产生一定的影响［3-4］.红细胞在经400gy辐照后，短时间内可增加细胞的稳定性［5］.本研究采用小于100gy的γ射线处理红细胞，以β淀粉样肽（βamyloidpeptide,aβ）诱导红细胞膜损害为实验模型，研究此剂量范围的辐射对红细胞某些性质的影响，以及对aβ的细胞毒性的作用.　　1材料和方法　　1.1材料新

4、鲜全血取自健康志愿者，枸醛酸抗凝；aβ和荧光探针1,6二苯基1,3,5己三烯（diphenylhexatriene,dph）（美国sigmaaldrich公司）；其它试剂均为国产分析纯.1240型紫外可见分光光度计(日本岛津公司)；ls55型荧光分光光度计（美国perkinelmer公司）；3k30型冷冻离心机（美国sigma公司）；gammacellr1000型血液辐照仪(加拿大nordian公司)；quanta200型环境扫描电镜（荷兰philipsfei公司）.　　1.2方法　　1.2.1红细胞的制备和辐照处理取新鲜全血750

5、g，4℃离心10min，吸去上层血浆和白细胞，并用等渗pbs（150mmol/lnacl，2.7mmol/lkcl，10mmol/lna2hpo4，2mmol/lnah2po4，ph7.4）洗涤3次,制备成200ml/l细胞悬液，然后用γ射线照射，照射剂量分别为0，50和100gy.　　1.2.2红细胞溶血率的检测照射过后的红细胞悬液用等渗pbs稀释至20ml/l，加入aβ使其终浓度为5mg/l，37℃水浴30min后取出，750g，4℃离心10min，取上清，540nm处测出吸光度值a1；沉积红细胞用蒸馏水全溶血后离心，用同样方法测得吸光度值a2

6、.按下式计算溶血率：溶血率（%）=a1/（a1+a2）×100%.　　1.2.3扫描电镜观察红细胞形态处理过的红细胞经终浓度为10g/l戊二醛固定，用500，700，900，1000ml/l丙酮系列脱水，喷金后进行扫描电镜观察.　　1.2.4红细胞的渗透脆性测定红细胞分为未照射组，50gy照射组和100gy照射组.配制不同渗透压的pbs，其中nacl的浓度为0~135mmol/l，在上述pbs中分别加入各组红细胞悬液，细胞终浓度为2ml/l，37℃水浴30min，取出后以1.3.2中的方法分别测溶血率，以nacl浓度分别为135mmol/l和0mm

7、ol/l的pbs为对照和全溶血对照，计算50%溶血时的nacl浓度.　　1.2.5红细胞膜流动性的检测用四氢呋喃作溶剂配制2×10-3mol/l的dph储存液,于棕色瓶中4℃低温保存.工作液浓度为5×10-5mol/l,临用前用等渗pbs稀释.红细胞用等渗pbs稀释至2ml/l浓度，与dph工作液等体积混合，于37℃水浴孵育45min后，检测偏振荧光（激发光波长为362nm，发射光波长为450nm）.　　统计学处理：用spss10.0统计软件进行处理，实验数据以x±s表示，多个样本均数比较采用方差分析及t检验.　　2结果　　2.1红细胞的溶血率在未

8、经辐照处理的情况下，等同实验操作可使红细胞发生少量溶血（溶血率<4%），而在红细胞经γ射线照射后，自然溶血率随着辐照