hplc法测定不同产地鸡血藤中原儿茶酸含量-医药学

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1、精品文档HPLC法测定不同产地鸡血藤中原儿茶酸含量/医药学【摘要】目的建立鸡血藤的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法测定了原儿茶酸的含量，C18色谱柱，流动相为甲醇-水-冰醋酸，流速/min，检测波长260nm。结果原儿茶酸与样品中其他组分分离效果较好，原儿茶酸在～μg范围具有良好线性关系，相关系数r=；平均回收率为%,RSD为%。结论采用此法测定鸡血藤中原儿茶酸的含量，准确可靠，可用于该药材的质量控制。【关键词】鸡血藤原儿茶酸高效液相色谱法【Abstract】Objecti/～μg，r=；%,andRSD为%.ConclusionThemethodwasaccurat

2、eandcanbeusedforthedetemrminationofconstituentsforSpatholobussuberectusDunn.【Keywords】spatholobussuberectusdunn;protocatechuicacid;HPLC2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–独家原创5/5精品文档鸡血藤为豆科植物鸡血藤SpatholobussuberectusDunn的干燥藤茎，别名血风藤、大血藤、血风、活血藤。鸡血藤为常用活血化瘀中药，具有补血、活血、通络作用【1】。《中国药典》收载了1个种，主要分布在广西、云南、贵州等地，鸡

3、血藤可极显著的使环磷酰胺致贫血小鼠的红细胞值、血红蛋白值和白细胞值上升【2】，能扩张外周血管,增加器官血流量,实验证实对犬股动脉有明显扩张作用【3】，对免疫系统具有双向调节作用【3】,能降低血脂、抗动脉样硬化作用【4】。鸡血藤中含有多种化学成分，但《中国药典》中并无含量测定方法，为此，笔者采用HPLC法测定了鸡血藤药材中原儿茶酸的含量，方法简便、灵敏、准确，对鸡血藤药材的质量鉴定有一定的参考价值。1仪器与试药高效液相色谱仪：岛津LC-10A液相色谱仪，SPD-10A紫外检测器，南宁威玛龙色谱工作站，HT-230A柱温箱。色谱柱为Diamonsil钻石C18柱；LIBROR

4、AEL-160型万分之一电子分析天平；DS-250A型超声清洗仪。原儿茶酸对照品购自中国药品生物制品检定所；鸡血藤药材产自广西、云南、贵州，由贵州大学生物与科学学院生物系关平教授鉴定为SpatholobussuberectusDunn的干燥根茎。甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其余试剂均为分析纯。2方法与结果色谱条件用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-水-冰醋酸为流动相；检测波长为260nm。理论塔板数按原儿茶酸峰计算应不低于3000。对照品与样品色谱图见图1。对照品溶液的制备精密称取原儿茶酸对照品适量，加酸性水制成每1ml含3μg的溶液，即得。2016全新精品资料-全新公

5、文范文-全程指导写作–独家原创5/5精品文档供试品溶液制备取本品细粉1g，精密称定，加水回流2次，每次20ml，滤过，合并滤液并浓缩至约2ml，加入甲醇10ml，滤过，滤液挥干，再加入乙酸乙酯20ml和1mol/L的盐酸，超声30min，滤过，滤液挥干，残渣加20ml酸性水超声5min使溶解，滤过，滤液过微孔滤膜，作为药材供试品。测定法：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各l0μl，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件，以外标法计算含量。见图1、图2。2．4线性关系考察精密量取原儿茶酸对照溶液配制成1、2、3、4、5μg/ml，分别取10μl注入高效液相色谱仪，进行原儿茶酸

6、含量测定，以原儿茶酸峰面积A对原儿茶酸浓度C进行线性回归，线性回归方程：A=46033C－，线性范围：～μg，相关系数r=。根据实验结果，原儿茶酸在～μg范围内，峰面积与进样量呈良好的线性关系。精密度考察取同一对照品，分别重复进样6次，测定结果，对照品溶液中原儿茶酸RSD=%。 重复性试验取本品6份，精密称定样品，按【样品含量测定】项下的方法操作，制成供试品溶液，测定原儿茶酸的平均含量为μg/g，RSD为%。稳定性试验将供试品溶液在室温下贮存，于0、2、4、6、8h测定，结果样品溶液在8h内稳定，RSD为%。2016全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作–独家

7、原创5/5精品文档图1原儿茶酸对照品HPLC色谱图图2样品HPLC色谱图加样回收率试验精密称取已知含量的样品共6份，分别加入等量原儿茶酸对照品，照供试品方法制备，测定含量，原儿茶酸平均回收率为%,RSD=%，结果见表1。表1原儿茶酸回收率实验结果不同产地鸡血藤中原儿茶酸的含量测定按项下方法,制备供试品溶液,测定3个产地鸡血藤药材中原儿茶酸的含量,测定结果见表2。3讨论3．1原儿茶酸属有机酸，极性较大，选择反相色谱法，流动相选择甲醇：水的体系，出峰时间较长，且峰形较宽；选用甲醇：水的体系，出峰时间适中，峰形仍较宽；故选用甲醇：水