HPLC法测定不同产地山里红中表儿茶素含量.pdf

《HPLC法测定不同产地山里红中表儿茶素含量.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、江西中医药2014年6月第6期总45卷第378期工中表儿茶素含量东龙(江西中医药大学现代中药制剂教育部重点HPLC法，测定不同产地山里红中表儿茶素的含量。色谱柱}酸溶液，梯度洗脱，流速1mL／min，检测波长：280nm，柱温中，山东省青州市出产的山里红含量最高，山西省运城市绛手法提供参考。药大学标本馆，见表1。表1样品来源编号产地编号产地1山东省潍坊市临朐县8山东省泰安市岱岳区2山东省青州市9辽宁省海城市大桥县3山东省昌邑市l0河北省迁安市4山东省淄博市沂源县11河北省承德市兴隆县5山东省临沂市平邑县l2河北省邢台市清河县6山东省临沂市沂水县l3河南省新乡市新乡

2、县7山东省临沂市蒙阴县14山西省运城市绛县量控制方法提供参考。2方法与结果1仪器与试药2．1对照品溶液制备精密称取表儿茶素6．5mg，1．1仪器Agilent1260型高效液相色谱仪(美国，置于10mL容量瓶中，加入8％甲醇溶液定容至刻VWD检测器，1260化学工作站)，BT25S型十万分度，得到浓度为0．65mg／mL的对照品母液，经之一电子天平(赛多利斯科学仪器(北京)有限公0．221~m微孔滤膜过滤，备用。司)，BTSS型万分之一电子天平(赛多利斯科学仪2．2供试品溶液制备称取干燥的山里红样品器(北京)有限公司)，N一1001型旋转蒸发器(东京lOOg，经粉

3、碎，加入70％的乙醇500mL，在70％条件理化器械(株)独资工厂)，KQ一300VDB型双频数下回流提取3次，每次1h，经过滤，合并滤液，减压控超声清洗器(江苏省昆山市超声仪器有限公司)。回收溶剂，得到山里红总提取物。取一定量的的山1．2试药表儿茶素对照品(批号：110878—里红总提取物置于10mL容量瓶中，加甲醇，超声提200102)均购自中国药品生物制品检定所。乙腈取30rain，放置室温，用甲醇定容至刻度，摇匀，经(色谱纯)购自美国Dikma公司，磷酸(分析纯)购自0．221~m微孔滤膜，得到供试品溶液。西陇化工股份有限公司，双蒸水(实验室自制)。山里红

4、采集时间为2012年11月，所有药材经2．3色谱条件色谱柱YMC—TriartC18(250mm×江西中医药大学刘荣华教授鉴定，保存于江西中医4．6ram，5)；流动相：乙腈(A)～0．4％磷酸溶液基金项目：国家自然科学基金项目(81260638)；江西省自然科学基金项目(20132BAB205083)。¨作者简介：邵峰(1980一)，男，硕士，讲师。研究方向：中药质量评价。Tel：(0791)871198658，E—mail：shaofeng0729@163．corn。十通信作者：刘荣华(1964一)，男，博士，教授，硕士生导师。Tel：(0791)871190

5、1l，E—mail：rhliu@163．corn。·63·JIANGXIJOURNALOFTRADITIONALCHINESEMEDICINE(B)，梯度洗脱，0～10min，8％～15％A；10～30min，含量最低。见表3。15％一15％A。流速1mL／min，检测波长280nm，柱表2表儿茶素加样回收率测定温25~C，进样量201xL。理论塔板数大于3000，见图1。B表3不同产地山里红中表儿茶素含量测定(n=3)IlO如3o010．2o30t／t：~曲A．供试品；B．对照品；1．表儿茶素图1山里红HPLC色谱图2．4方法学考察2．4．1线性关系考察精密吸取

6、溶液浓度分别为0．00166，0．0166，0．083，0．166，0．83，1．00mg／mL表儿茶素对照品溶液，按“2．3”项下色谱条件测定峰3讨论面积。以进样浓度(mg／mL)为横坐标()，色谱峰生物体内的氧自由基在心血管疾病的发生与发面积为纵坐标(y)，得标准曲线，建立表儿茶素回归展方面起着重要的作用。本课题组曾研究发现，山方程，即Y=11741X一12．712，r=0．9993，在楂叶中的表儿茶素对于羟自由基和过氧化氢具有较0．00166～1．00mg／mL范围内呈良好线性关系。强的清除活性J。鉴于此，本研究在以往相关文献2．4．2精密度试验精密吸取表儿

7、茶素对照品溶报道的基础上]，采用HPLC定量分析技术，建立液201xL，按“2．3”项下色谱条件，连续进样6次，计山里红中表儿茶素含量测定的方法。该方法操作简算峰面积的RSD为0．043％，表明仪器精密度良好。单，准确，重复性好，易于推广。2．4．3稳定性试验精密吸取同一供试品溶液，按参考文献“2．2”项方法制备供试品溶液及“2．3”项下色谱条[1]国家药典委员会．中华人民共和国药典．一部[s]．北京：中国医件，分别在第0，2，4，6，8，10h间隔进样20／xL，测得药科技出版社，2010：29．表儿茶素峰面积积分值，计算供试品RSD为[2]曹莹，梁日欣，杨滨，

8、等．(一)