不同浓度的胎牛血清对骨髓间充质干细胞纯度及周期的影响-论文.pdf

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1、·742·安徽医科大学学报ActaUniversitatisMedicinalisAnhui2014Jun；49(6)不同浓度的胎牛血清对骨髓间充质干细胞纯度及周期的影响陈小丹，何家才摘要目的比较含有体积分数为0．10、0．15、0．20的胎牛养，每天取1块培养板用CCK．8检测其吸光度值(OD)。结血清(FBS)的完全培养基对体外培养的大鼠骨髓间充质干果CD45阴性表达，CD29、CD90、CD44阳性表达，3种完全细胞(BMSCs)纯度及细胞周期的影响，寻求适宜干细胞培养培养基培养的BMSCs的表面标志物在前2代时差别较大，的FBS浓度。方法用颈椎脱臼法处死SD大鼠，采用全骨

2、但在P3，P4时差别已较少，P4时均可以获得较纯的BMSCs；髓贴壁法分离培养大鼠BMSCs。实验分为A、B、C3组，分细胞周期结果显示，在同一时间点，G。／G．期：A、B、C3组随别为FBS体积分数是0．10、0．15、0．20的完全培养基培养的着FBS浓度的增加，G。／G。期降低且差异无统计学意义；G：／BMSCs，比较各组细胞在第2、3、4、5代(P2，P3，P4，P5)的M期：在培养后的24h，A、B、C3组差异有统计学意义(P

3、同浓度的完全培养基连续培养4d，用流式细胞仪测均无差别；S+G／M期随FBS浓度的增加而增高。细胞活其在培养后的24、48、72、96h的细胞周期；收集P3BMSCs力结果显示，在24h时A、B、C3组的OD值依次增大，差异制备细胞悬液接种到6块96孔板，每块板接种的BMSCs分有统计学意义(P<0．05，F：5．002)，随时间的延长3组之别用FBS体积分数是0．10、0．15、0．20的完全培养基进行培间无明显差异。结论这3种培养基在P4能获得较纯的BMSCs；细胞周期及活力结果显示，3种完全培养基均能促进2013—12—20接收BMSCs的增长，3组之间不存在差异。体积分数

4、为0．10的基金项目：国家自然科学基金(编号：81371114)；安徽省自然科学基FBS已满足BMSCs的分离和扩增，要想在短期内获得较纯金(编号：11040606M173)；安徽医科大学博士科研资助基的BMSCs，原代培养使用体积分数为0．15，传代用0．10FBS金(编号：XJ201034)；安徽高校省级自然科学研究重点项的完全培养基。目(编号：KJ2013A154)关键词骨髓问充质干细胞；胎牛血清；细胞周期；表面标志作者单位：安徽医科大学口腔医学院，安徽医科大学附属口腔医院，中图分类号R一33安徽省口腔疾病研究中心实验室，合肥230032文献标志码A文章编号1000—149

5、2(2014)06—0742—06作者简介：陈小丹，女，硕士研究生；何家才，男，教授，主任医师，硕士生导师，责任作者，E—mail：hejiacai@163．con骨髓间充质干细胞(bonemesenchymalstemEffectongp91Ph。humancoronaryarteryendothelialcellsintheprocessofoxidativestressbyvalsartanWangCheng一，HanWeixing，WuJijun，etal(DeptofCardiology，TheAffiliatedHospitalofAnhuiMedicalUniver

6、sity，Hefei230022；DeptofDiagnostics，TheFClinicalCollegeofAnhuiMedicalUniversity，Hefei230032)AbstractObjectiveTostudytheeffectonhumancoronarya~eryendothelialcells(HCAEC)gp91intheprocessofoxidativestressbyvalsartan．MethodsThecontrolgroup：adherentcultureHCAECinvitro，nootherintervention；theexperim

7、entalgroup：underthesameconditionswithvalsartan(10~zmol／L)trainfor24hours．U—singWesternblotandcellimmunofluorescencemeasuregp91levelsintwogroupsofcells．Theresultsweresta—tisticallyanalyzedandcomparedinbothgroups．ResultsTheexperimentalgroupgp91