杏仁提取条件的探讨.doc

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1、杏仁提取条件的探讨苦杏仁提取物最佳提取条件研究苦杏仁提取物的有效成分苦杏仁貳的化学性质并不活泼，对健康组织影响很少，仅会侵犯和破坏癌细胞,可到达抗癌的效用。苦杏仁貳提取釆用的是水提法，那么，在提取过程屮，哪些因素会影响到苦杏仁貳的含量？这些因素在怎样的条件下会使苦杏仁貳的含量达到最高点呢？西安源森生物对此采用正交试验法进行了研究：一、西安源森生物实验材料与仪器(%1)材料苦杏仁购自陕西当地药农；标准品来源于西安源森生物实验室；英它试剂均为分析纯。(-)仪器LC-10A高效液相色谱仪；SPD-10A可见紫外检测器；CLASS-VP色谱工作站。(三)色谱条件流动相乙片

2、青:水(15:85)；流速lml/min,波长215nm；色谱柱150mmX4.6mmC18；柱温32°Co二、苦杏仁提取物的最佳提取条件实验方法与结果(-)苦杏仁貳提取的实验方法苦杏仁提取物的主要有效成分苦杏仁貳在一定的湿度和温度之下容易被自身所含有的苦杏仁酶及樱叶酶等成分分解，因此苦杏仁须炮制后再入药。苦杏仁提取物水提工艺采用水惮法对苦杏仁炮制前后苦杏仁昔含量进行比较，即各取粉碎的杏仁：LOg,用100ml水，置电热煲中加热，惮杏仁待水沸腾后立即加入保持沸腾lOmin后放冷，此时将两份杏仁同时加热，记吋，惮杏仁50min,另一份60min,定容100ml,作1

3、00倍稀释，以上过程重复一次。HPLC测定杏仁昔含量，结果未水惮杏仁杏仁昔损失28%0因此，本工艺采取杏仁水惮lOmin工艺进行炮制。(-)苦杏仁背提取的正交试验为获得炮制后苦杏仁提取物水提工艺的较佳条件，取炮制杏仁药材5g,按表2条件加水提取，提取液按不同体积用水定容至100ml和250ml,HPLC测定杏仁试含量。以杏仁试的提取量为考察指标，选用L9(34)正交表(表1),按3因素3水平进行正交试验，有关试验结果及分析见表2,表*表2关于杏仁药材提取条件的正交试验结果分析:以杏仁昔提取量为指标，则：A因素:显著性因素，且II>I>III；B因素:极

4、显著性因素，且II>III>I;c因素:极显著性因素，-ain>；n&旳i；由以上结果可见，较佳提取条件应为A2B2C3,即每次加10倍量水，回流提取3次，每次lh。（三）提取次数的选择由于提取次数对杏仁貳提取量的影响最为显著，为进一步优化杏仁水提工艺，西安源森生物实验室进行了水提次数的优选实验：称取10g炮制杏仁药材，加10倍水，沸水提取lh,共提取4次，各次均定容至100ml,10倍稀释，测定第一、二次水提液和4次水提液中总杏仁背含量，结果见表4。由表4结果可确定苦杏仁提取物最佳提取工艺为10倍量水提取2次，每次lho（四）水煎时间对杏仁试含量

5、影响有文献采用硝酸银滴定法测定杏仁昔：认为杏仁水煎条件以8倍水,10min为佳。为探讨水煎时间是否影响杏仁貳含量，取粉碎的惮杏仁10g,用100ml水，置电热煲中加热，于30min,60min,90min,120min吋各取出200UI,稀释100倍，HPLC测定杏仁昔含量，结果表5。冇以上结果可知，惮杏仁水煎2h,对杏仁试含量不会降低。三、苦杏仁提取物最佳提取条件实验结果讨论（-）由以上实验可以得出，苦杏仁提取物的最佳提取工艺为10倍水量提取2次，每次lh。（二）通过水惮与未水惮苦杏仁苦杏仁的对比研究可知，苦杏仁原料的炮制步骤是十分必要的；（三）本研究采用HPL

6、C进一步探讨了水煎时间对惮苦杏仁昔含量的影响，结果表明苦杏仁炮制后水提2h内，杏仁试的含量不会下降,且提取时间也是影响苦杏仁昔的显著因素。本文以HPLC测定苦杏仁貳的含量,用重复的正交试验对炮制后的苦杏仁进行研究，结果真是可靠，这对于能够应用于晩期癌症症状的苦杏仁提取物的优质生产有着十分重要的意义!