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《rnai抑制nanog表达对肝癌细胞hepg2中mdr1表达及阿霉素敏感性的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、第36卷第4期第三军医大学学报Vo1.36.No.43462014年2月28日JThirdMilMedUnivJan.282014文章编号:1000-5404(2014)04-0346—05RNAi抑制NANOG表达对肝癌细胞HepG2中MDR1表达及阿霉素敏感性的影响周嘉嘉,陈汝福,邓小耿,周雨,周泉波,张杰,伍耀豪,曾乐祥,邱荣林(510120广州,中山大学孙逸仙纪念医院外科)[摘要]目的探讨抑制NANOG表达对肝癌细胞HepG2中多药耐药基因1(muhidrugresistancegene1,MDR1)表达及阿霉素敏感性的影响。方法将靶向NANOG基因的特异性s
2、iRNA转染肝癌细胞HepG2,Real—timePCR和Westernblot检测siRNA沉默NANOG基因后NANOG、MDR1mRNA和蛋白的表达,平板克隆形成实验检测沉默NANOG基因后对细胞增殖能力的影响,流式细胞术检测沉默NANOG基因后对细胞周期的影响,CCK一8法检测沉默NANOG基因后HepG2细胞对阿霉素的敏感性情况。结果靶向NANOG基因特异性siRNA转染肝癌细胞HepG2后,能有效抑制NANOGmRNA和蛋白表达,与Mock组比值分别为(0.32±0.05)和(0.38±0.08);与Mock组比较,沉默NANOG基因后,细胞克隆形成率下降
3、[(8.51±3.63)%vs(17.13±2.24)%,P<0.05],进入G0/G】期的细胞比例增多[(75.33±8.21)%vs(57.81-4-5.05)%,P<0.05],HepG2细胞对阿霉素的敏感性增强(P<0.05),HepG2细胞内MDR1mRNA和蛋白表达下降,与Mock组比值分别为(0.35±0.06)和(0.41-4-0.08)。结论抑制NANOG表达可引起肝癌细胞HepG2中MDR1的表达下调并增强细胞对阿霉素的敏感性。[关键词]肝癌;NANOG;阿霉素;多药耐药基因1;化疗敏感性[中图法分类号】R73—36;R735.7;R979.14[
4、文献标志码】ARNAiknockdownofNANOGinhibitsMDR1expressionandpromotesdoxorubicinsensitivityinhumanhepatomaHepG2cellsZhouJiajia,ChenRufu,DengXiaogeng,ZhouYu,ZhouQuanbo,ZhangJie,WuYaohao,ZengLexiang,QiuRonglin(DepartmentofSurgery,SunYat—seDMemorialHospital,SunYat—senUniversity,Guangzhou,GuangdongP
5、rovince,510120,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheeffectofNANOGknockdownonmuhidrugresistancegene1(MDR1)expressionanddoxorubicinchemosensitivityofhumanhepatocarcinomaHepG2cells.MethodsTransienttransfectionofthespecificsiRNAtargetingNANOGgeneintoHepG2cellswasperformed.Theexpressiono
6、fNANOGandMDR1atmRNAandproteinlevelswasdetectedbyreal-timePCRandWesternblotting.TheinfluenceofNANOGknockdownoncellproliferationabilitywasexaminedbycolonyformationas—say.Theinfluenceoncellcyclewastestedbyflowcytometry.Thedoxorubicinchem0sensitivityofHepG2cellswasdetectedbyCCK一8assay.Resul
7、tsTransfeetionofthespecificsiRNAtargetingNANOGgeneintoHepG2cellscouldeffectivelyinhibittheexpressionofNANOGmRNAandprotein,withtheratioofsiRNAgrouptomockgroupof0.32±0.05and0.38±0.08,respectively.Comparedwithmockgroup,thesiRNA—mediatedsilencingofNANOGgeneinHepG2cellsresultedindec
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