amfr过表达对a549细胞mdr1表达影响的研究

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1、中图分类号密级AMFR过表达对A549细胞MDRl表达影响的研究InvestigationofeffectofoverexpressionofautocrinemotilityfactorreceptoronMDRlgeneexpressionlevelinA549cells计：学位论文：38页表格：4个表格：／卜插图：7幅指导教师：吴泰华教授申请学位级别：硕士学位培养单位：大连医科大学张莹莹学科(专业)：内科学完成时间：二。一三年四月答辩委员会主席：附件1：独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人

2、在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得大连医科大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：盘堡壁，签字日期：卫年』月三日关于学位论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解学校有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权大

3、连医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。本学位论文属于(请在以下相应方框内打“4”)：●1．保密口，在一年解密后适用本授权书。2．不保密日。作者签名：g长芭箧、日期：1口，≥年孑月j日导师签名：日期：1口，>年J月哆日目录一、摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯1(一)中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯·⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯··1(二)英文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯3二、正文⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5(一)前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯5一(、一)日lJ舌⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯”⋯⋯一⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯“⋯⋯(二)材料和方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯61．3主要仪器及耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯82．方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．1细胞的复苏、传代、冻存⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯92．2真核表达质粒转染A549细胞⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯102．3免疫印迹检测AMFR的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯112．4免疫荧光检测各组AMFR⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯142．5荧光实时定量PCR检测AMFR和MDRl⋯⋯⋯⋯14(三)结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯161．质粒提取浓度测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯162．免疫印迹检测各组转染后AMFR的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯173．免疫荧光检测各组转染后AMFR的表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯174．荧光实时定量PCR检测转染后AMF

6、R和MDR1表达的差异⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯18(四)讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯20(五)结论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯22(六)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯23三、综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(一)综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯27(二)参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32四、致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯38大连医科大学硕士学位论文削洒R过表达

7、对A549细胞旧R1表达影响的研究硕士生姓名：张莹莹指导教师：吴泰华教授指导小组：吴泰华教授专业名称：内科学摘要背景：多药耐药现象是目前影响肺癌化疗效果及患者预后的一个重要和最常见的原因，寻找可引起多药耐药现象的物质对于提高肺癌化疗疗效及靶向治疗具有长远意义。细胞自分泌运动因子受体及其配体可引起肺癌细胞转移潜能的增加，与肺癌恶性程度提高、肿瘤转移及预后不良有密切关系，因此探讨自分泌运动因子受体是否影响肺癌耐药性具有重要的临床意义。目的：本实验观察通过转染AMFR真核表达质粒介导的AMFR过表达对肺腺

8、癌细胞A549MDRl的影响。方法：大量提取真核表达质粒pcDNA3．1和pcDNA3．1．AMFR后，将体外培养的肺腺癌细胞A549随机分为空白对照组、pcDNA3．1组、pcDNA3．1．AMFR组，分别转染Lipofectamin2000／一、Lipofectamin2000／pcDNA3．1和Lipofectamin2000／pcDNA3．1．AMFR；应用免疫荧光、荧光实时定量PCR、免疫印迹确定AMFR的过表达，应用荧光实时定量PCR检测MDRl在各实验组