广西鹅γ干扰素基因的克隆与序列分析.pdf

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1、广西农业科学2010。41(6)：602--605GuangxiAgriculturalSciences广西鹅吖干扰素基因的克隆与序列分析胡丽萍-，胡晓静z，付薇1，徐贤坤1，何丹2，刘棋1，熊毅”(1广西动物疫病预防控制中心，南宁530001；2广西大学动物科学技术学院，南宁530005)摘要：为进一步研究鹅干扰素(IFN)的分子生物学特性及抗病毒作用机理，提取经刀豆素(ConA)刺激培养的鹅外周血淋巴细胞总RNA，采用RT-PCR技术扩增获得鹅IFN叫基因，将其克隆至pMDl8一喇戋体并进行序列测定分析。结果表明，克隆获得的广西

2、鹅IFN一^y基因与GenBank上已公布的鹅IFNl基因核苷酸序列的同源性均高于99．2％、氨基酸同源性均高于98．2％；与其他动物的IFN一^y基因核苷酸及氨基酸序列比较，亲缘关系越远，同源性越低。关键词：鹅；．y干扰素；克隆；序列分析；广西中图分类号：$858．33文献标识码：A文章编号：1002—8161(2010)06-0602-04CloningandqanalysisofⅢN—Y。Guangx。gloningandseuenceanalysisotinuangxlgooseqltI州一YHULi—pin91，HUXia

3、o-jing工，FUWeil，XUXian—kunl，HEDan2，LIUQil，XIONGYil’(1GuangxiCenterforAnimalDiseasePreventionandControl，Nanning530001，China；2CoHegeofAnimalScienceandTechnology，GuangxiUniversity，Nanning530005，Chi眦)Abstract：Thepresentstudyw硇conductedtOanalyzethemolecularbiologicalcharacte

4、risticsandantivirusactionmechanismofgooseinterferon一1(IFN—忉．7I'0talRNAw髂extractedfromperipheralbloodlymphocytesofgooseraisedwithConA．Thegooseinterferon一^y(IFN—_y)cDNAwasamplifiedusingRT-PCR，clonedtopMDl8-Tandsequenced．Thean—cleotidehomologiesbetweentheGuangxigooseIFN叫g

5、eneandthegooseIFN1genesinGenBankwerehigherthan99．2％．t}Ieaminoacidhomologiesofthemwerehigherthan98．2％．ThenucleotideandaminoacidhomologieswithTurkey，Numidame／eagr／s，Corm'nixJaponica,Phasianuseolchicus，Chicken，Human,etc．werostepdowninaccordancewiththeirfargeneticrelations

6、hips．Keywords：goose；interferon-T；cloning；sequenceanalysis；Guangxi干扰素(IFN)是体内一种重要的干扰病毒繁殖的免疫活性细胞因子。由Isaacs等⋯在研究鸡胚绒毛尿囊膜中禽流感病毒时首次发现。IFN分为I型和Ⅱ型，I型IFN主要由病毒和微生物诱导产生，目前发现的I型IFN有IFN一仅、IFN—B、IFN一8、IFN—K、IFN一入、IFN一∞、IFN一下7种型别，主要参与机体抗病毒、抗肿瘤活性等：Ⅱ型IFN主要由淋巴细胞受有丝分裂原或特异性抗原刺激产生，目前仅发现IFN

7、一^y一种型别，主要参与诱导组织相溶性抗原的表达和免疫调节效应。目前在禽类只发现IFN—a和IFN一1。IFN具有严格的种属特异性。不同种属甚至相同种属不同品种动物的IFN基因均存在结构和功能差异。自20世纪80年代，人类IFN一1基因克隆成功后[21，各国学者相继开展了动物IFN基因克隆研究。先后克隆获得鼠[3】、绵羊[41、猪[53、犬[剐、鸡[73、山羊IS]等动物的IFN一．y。与哺乳动物相比，禽类IFN分子水平的研究相对较晚，直至1994年，Sekellick等[9]才首次报道鸡IFN基因。随后Schuhz等[101报道了

8、鸭IFN基因序列，但关于鹅IFN的报道甚少。病毒性疾病在养鹅业生产中的危害很大，但目前该类疾病的防治相对比较落后，而且鸡、鸭等家禽IFN药物已经投入生产使用[11-D]，因此加强鹅IFN的研究显得尤为重要。本研究参照有关鸡、鸭等禽类I