感染性疾病实验室诊断ppt课件.ppt

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1、感染性疾病实验室诊断LaboratoryDiagnosisofInfectiousDiseases1目的要求1．掌握感染性疾病常用的实验室检测项目及其临床意义和评价2．熟悉引起血流、中枢神经系统、呼吸系统、胃肠道、泌尿系统感染的常见病原体与常见疾病及病原学检查3．了解当今感染病的特点、感染类型2第一节概述感染性疾病：病原体宿主疾病病原体（细菌、真菌、病毒、寄生虫）3一、当今感染病的特点1感染性病原体的种类不断发生变迁2宿主的免疫防御能力下降3内源性感染与条件致病菌的感染增加4二、感染类型（一）按病

2、原体分类1.传统病原体感染细菌：病毒：真菌：寄生虫2.新发病原体：SARS冠状病毒新甲型H1N1流感病毒高致病性禽流感病毒5(二）按疾病特征分类1.病原体被清除2.隐性感染(covertinfection)，亦称亚临床感染一般占人群的90％或以上3.显性感染(overtinfection)又称为临床感染发病快慢和病程长短：急性感染和慢性感染感染部位及性质：局部感染和全身感染全身感染：①菌血症②败血症③毒血症④脓毒血症6(三）按病原体来源外源性感染内源性感染7三、感染性疾病的实验诊断（一）一般实验检

3、测WBC常规检查C-反应蛋白（CRP）血清降钙素原（PCT）器官功能改变的检测8（二）病原学实验诊断临床病原体检查目的明确感染病原体指导治疗，预防，判断预后9第二节感染性疾病的常用病原学检测病原学检测基本程序①正确、规范采集和运送标本②显微镜对标本或组织中的病原体的形态学检查③病原体的分离培养和鉴定④用免疫学技术对病原体抗原或相应抗体的检测⑤用分子生物学方法对病原体特异性基因的检测10一、临床标本的采集与处理（一）标本采集的一般原则1.早期病程早期、急性期或症状典型时使用抗生素前2.无菌采集应无污

4、染，严格进行无菌操作采集的标本均应盛于无菌容器内3.根据目的菌的特性用不同的方法采集4.适量标本,不同病程采集不同部位标本5.安全采集做好标记11（二）标本的处理原则：保持病原体活力，保持标本不被污染，也不污染环境1.尽快送检对环境敏感的细菌应保温立即送检,其他所有采集后最好在2小时内送检,不能及时送检,应注意保存2.必须注意安全防护,切勿污染环境3.厌氧性标本应放在专门的运送瓶或试管内运送，有时可直接用抽取标本的注射器运送12二、检验方法查病原体：形态与结构检查分离培养和鉴定检测病原体成分（抗原

5、和核酸）检测患者血清中特异性抗体代谢产物（生化试验）毒素：外毒素、内毒素13（一）直接显微镜检查（形态与结构检查）1.染色标本检查法染色标本：了解病原体的形态、染色性或观察宿主细胞内包涵体临床意义：1.镜检可以了解有无病原体及大致的量2.根据细菌形态、结构和染色性有助于对病原体的初步识别和分类3.通过形态学检查可得到初步诊断，对临床早期诊断和治疗疾病有一定的参考意义如CSF找到抗酸杆菌，应初步考虑结核分枝杆菌感染14革兰阳性革兰阴性抗酸染色15培养在McCoy细胞的沙眼衣原体吉姆萨染色的McCoy

6、细胞，含大衣原体包涵体，使部分细胞核不清楚。（吉姆萨染色,放大1000倍）狂犬病毒可于细胞浆中可形成嗜酸性包涵体16新生隐球菌假丝酵母菌（白色念珠菌）革兰染色墨汁负染172.不染色标本1)检查生活状态下细菌的动力及运动状况2）螺旋体由于不易着色并有形态特征对某些病原菌作出初步鉴定，如霍乱弧菌常用方法压片法(压滴法)或悬滴法暗视野显微镜或相差显微镜检查18体癣皮屑可见关节孢子19HAVPARTICLESFOUNDINFECALEXTRACTSBYIMMUNOELECTRONMICROSCOPYHAV

7、形态电镜图粪便标本负染X2000003.直接电镜检测EM免疫电镜技术IEM20（二）分离培养和鉴定分离培养是微生物学诊断的金标准，是最可靠的传统诊断技术临床意义：1.明确感染病原体2.为临床提供体外抗微生物药物敏感试验结果21药物敏感试验标本培养特征形态特征生化试验血清学试验毒力试验普通琼脂平板？血平板？选择培养基？1.细菌的分离培养和鉴定22培养特征23细菌学诊断形态特征血清学鉴定24大肠埃希菌对照-吲哚试验枸椽酸盐利用试验大肠埃希菌甲基红试验VP试验大肠埃希菌大肠埃希菌对照-对照+对照+生化

8、试验25一）病毒分离培养1．动物接种（二）病毒的分离与鉴定2．鸡胚培养卵黄囊接种、绒毛尿囊膜接种尿囊接种及羊膜腔接种敏感动物合适部位263．组织细胞培养：目前培养病毒应用最广的方法（1）原代和次代细胞培养（2）二倍体细胞培养（3）传代细胞培养27识别病毒在培养细胞中增殖病毒在培养细胞中增殖的指标1）细胞病变:细胞病变效应（CPE）、包涵体2）红细胞吸附（hemadsorption）细胞病变效应（CPE）：病毒感染细胞后引起的细胞病变，可出现细胞圆缩、裂解或细胞肿大、数个细胞融合成多